iPS細胞由来細胞からの核の単離による先進的マルチオミクス研究

まず、濃縮された生iPS細胞由来細胞懸濁液をコニカルチューブで入手し、460 gで摂氏4度で5分間遠心分離します。上清を捨てた後、新たに調製した0.5倍冷溶解バッファー100マイクロリットルを加えます。P100を使用して、ピペットを10回上下させて細胞を混合し、チューブを氷上で3分間インキュベートします。

次に、500マイクロリットルの冷やした洗浄バッファーをライセートに加え、チューブを遠心分離し、上清を捨てます。洗浄を繰り返した後、ペレットを120マイクロリットルの冷却希釈核緩衝液に再懸濁します。40μmのセルストレーナーを使用して、細胞懸濁液をろ過し、濾液に0.4%トリパンブルーを加えます。

最後に、顕微鏡下で単離された核の品質を評価します。この技術を用いて、凍結保存されたヒトiPS細胞由来造血前駆細胞から高品質な核を単離しました。