脊髄再生療法の検証のためのヒトSC-NES細胞の器官型スライスへの移植

ガラスマイクロニードルを準備するには、ホウケイ酸ガラスキャピラリーを極性ソケットに配置します。必要なパラメータを設定したら、プルボタンを押して針を生成します。次に、GFP陽性幹細胞をチューブに分割します。

カウントとペレット化の後、それらを目的の濃度で再懸濁します。細胞懸濁液を1.5ミリリットルのチューブに移し、移植のために氷の上に置きます。マイクロピペットを使用して、4マイクロリットルの細胞懸濁液をガラスマイクロニードルにロードします。

マイクロインジェクターの指定されたサポートに針を挿入し、まっすぐなピンセットを使用して針の先端を壊します。圧力を 10 PSI に設定します。パスツールピペットを使用して、キャリブレーションされたスライドガラスに鉱油を一滴塗布し、細胞懸濁液を液滴にマイクロインジェクションして、注入量のキャリブレーションの直径をメモします。

正しい容量を設定した後、細胞懸濁液をスライスに迅速にマイクロインジェクションします。蛍光実体顕微鏡下で、スライス中の細胞の存在を確認し、5%の二酸化炭素で摂氏37度でインキュベートします。