まず、手術中に麻酔をかけたラットの温度を制御するために、潤滑された直腸プローブを挿入します。鎖骨の上の麻酔をかけたラットの右下頸部領域に頸静脈領域を特定した後、DeBakey非外傷性鉗子を使用して皮膚を優しくつかみ、細かく鋭いハサミまたはメスで正確な切開を行います。標準パターンの鉗子で組織を優しく切ります。
頸静脈を見つけて、その筋肉コンパートメントから穏やかに解放します。4-0シルク縫合糸を配置して、頸静脈の遠位側をしっかりと結紮します。針ホルダー付きの縫合糸を使用して、頸静脈に張力をかけます。
頸静脈の近位側に4-0縫合糸を配置し、締め付けずに外科医の結び目を準備します。Vannasのマイクロ解剖ハサミを使用して、頸静脈に小さな切開を行います。小さな鉗子で静脈壁を慎重につかんだ後、PE50カテーテルを頸静脈に挿入します。
カテーテルを少し進め、静脈内の正しい配置を確認するために、少量の血液を採取して再注入します。前に準備した結び目を締めて、カテーテルを固定します。切開した部分にリドカインを一滴垂らします。
切開部を湿った滅菌ガーゼパッドで覆います。DeBakey Atraumatic Forcepsを使用して左脚のスカルパ三角形の皮膚をつかみ、細かい鋭利なハサミまたはメスで切開します。標準パターンの鉗子で組織を優しく縫合します。
大腿骨トライアドの位置を特定し、トライアドの下に1つの鉗子を置きます。次に、2番目の標準パターン鉗子を使用して、動脈を神経と大腿静脈から慎重に分離します。大腿動脈を遠位に結紮するために4-0縫合糸を留置し、ニードルホルダーで縫合糸を取り、大腿動脈に張力をかけます。
次に、大腿動脈の近位側に4-0縫合糸を配置し、閉じずに外科医の結び目を準備します。動脈をクランプした後、Vannasマイクロ解剖ハサミを使用して、大腿動脈に横切開を行います。標準的なパターンの鉗子で動脈壁をつかみ、カテーテルで大腿動脈を保持して大腿動脈をカニューレにします。
動脈をそっと緩め、血液がカテーテルに逆流していないことを確認します。信号が良好な場合は、カテーテルを動脈に少し進め、前に準備した外科医の結び目を締めます。ヘパリンをラットに投与し、湿らせた滅菌ガーゼパッドを切開した領域に置きます。.
10分間の安定化後、基礎血行動態値を5分間記録します。出血性ショックを誘発するには、1ミリリットルの注射器を使用して、大腿動脈から5ミリリットルの血液を5分間で採取します。.50%乳酸リンガー溶液と50%の収集血液を室温で混合して調製します。
ミックスで満たされた2ミリリットルの注射器を頸静脈カニューレの端に置きます。出血性ショックの維持のために、平均動脈圧が水銀柱の38ミリメートルを超えたら、大腿動脈から200マイクロリットルの血液を採取します。圧力が水銀柱の32ミリメートルを下回った場合は、頸静脈を通じて50%血液、50%授乳中のリンガー混合物の200マイクロリットルを注入します。.
ガーゼパッドで尾を滅菌した後、針の先端を使用して尾の端から血滴を引き出し、末梢血乳酸を測定します。最後に、シリンジポンプ付きの頸静脈カテーテルを通して20ミリリットルのシリンジを使用して、授乳リンゲル溶液でラットを蘇生します。