高速タンパク質液体クロマトグラフィー(FPLC)のためのアフィニティーカラムの調製と充塡(英語)

まず、コラムをクランプスタンドにできるだけまっすぐに取り付けます。各列の下部をストッパーで塞ぎます。各カラムの底に1〜2ミリリットルの開始バッファーを追加して、カラムパッキング中の気泡を防ぎます。

次に、カラムの上部を開き、気泡を防ぐために、カラムの縁に固定された金属ヘラまたはガラス棒に対して各スラリーの10ミリリットルを連続的に注ぎます。カラムからストッパーを取り外し、カラムの底部をチューブの一方の端に接続します。チューブのもう一方の端をFPLCシステムのUVポートに取り付けます。

ベッドサポートハウジングがフローアダプター本体に引っ張られていることを確認し、フローアダプター本体をカラムの上部にスライドさせます。カムラッチを1の位置にして、フローアダプターを下げます。次に、カムラッチを2の位置に切り替えます。

チューブをシステムに接続し、バッファーフローを1〜2分間開始して、チューブから空気を排除し、パッキング中の気泡を防ぎます。その後、ラッチを位置1に戻し、フローアダプターをバッファにスムーズに下げて気泡を避け、ラッチを位置2に戻します。ラッチを2番から3番に切り替えた後、カムベースとロッキングリングの両方を締めます。

次に、毎分10ミリリットルで3分間、または樹脂が十分に充填されるまでバッファーフローを開始します。