まず、マイクロ押出ポンプコントローラーのスイッチを入れます。対応する容量のシリンジを選択し、押出速度を0.08ミリリットル/分に設定します。次に、ヒドロゲルの体積を押出速度で割り、それを目的の印刷時間と調整して、押出しの持続時間を計算します。
次に、内径210μmの針を装着したシリンジをバイオプリンターのシリンジスロットに装着します。シリンジコントローラーを調整して、シリンジのプランジャーがネジに密着していることを確認します。次に、調製したカッパカラギーナン懸濁液浴の3ミリリットルを35ミリメートルの細胞培養皿に入れる。
コード設定に基づいて、皿をプラットフォームに配置し、印刷ヘッドが皿の底から1ミリメートル上にあることを確認します。その後、コードが入ったSDカードを3Dバイオプリンターに挿入します。コードファイルをアクティブにして、バイオプリンターを起動し、コントローラーの[開始]ボタンをクリックします。
次に、印刷したコンストラクトを405ナノメートルの青色光に1分間さらして、光架橋を開始します。1ミリリットルのピペットを使用して、カッパカラギーナンゲルを取り出し、続いて3ミリリットルのPBSを洗浄して取り出します。