農薬代謝物の細胞毒性を評価するためのトリアゾール農薬によるニンジンカルスの処理

収集したニンジンカルスを無菌条件下でさまざまなトリアゾール農薬で処理することから始めます。これを行うには、別々のガラスフラスコで、3グラムのニンジンカルスをMS培地で調製した各農薬溶液10ミリリットルと混合します。また、3グラムのニンジンカルスと10ミリリットルの無菌MS培地を別のガラスフラスコに混ぜます。

調製したニンジンカルスサンプルを130rpmおよび26°Cで暗所で72時間インキュベートします。すべての処理を三重に設定します。インキュベーション後、0.5ミクロンのガラス繊維フィルターを使用して、にんじんのカルスを濾過によって培地から回収します。

カルスを超純水で3回洗います。最後に、55°Cの凍結乾燥機を使用してカルスを凍結乾燥し、70ヘルツのハイスループットティッシュグラインダーを使用して3分間均質化します。すべての農薬の濃度は、培地中で指数関数的に減少しました。

ニンジンの角質のものは増加し始め、4時間または8時間でピークに達し、その後徐々に減少しました。これらの結果は、農薬がニンジンカルスによって迅速に取り込まれ、形質転換されることを示唆しています。無神経培養システムにおける農薬の時間的回収率は、72時間のインキュベーション後に残った農薬がわずか8.3〜11%であることを示しており、ほとんどの農薬が代謝物に変換されていたことを示している。