まず、切り出したばかりのラットの心臓肺ブロックを氷の上のガーゼシートの上に置きます。大動脈の周りの余分な脂肪を解剖します。次に、大動脈をトリミングし、カニューレ挿入のために約3〜5ミリメートルを残します。
肺動脈に1〜2ミリメートルの長さの切開を行います。トリミングされた心肺ブロックをカニューレの真下の氷の上に置きます。次に、フローコントロールチューブクランプを使用して、大動脈カニューレ挿入のためにランゲンドルフ側からの流れを調整します。
大動脈を左カニューレに慎重にカニューレします。黒いクランプで保持し、2/0シルク縫合糸で結びます。フローコントロールチューブクランプを完全に開いて、ランゲンドルフ灌流からの流量を増やします。
次に、アフターロードclを開きますamp。ソフトウェアで心臓の活動のモニタリングを開始します。肺の前面がオペレーターに面するように心肺ブロックを調整します。
左肺葉を2/0シルク縫合糸で結びます。残りの肺葉を2/0シルク縫合糸で一気に結びます。次に、結ばれた肺が後ろにくるように心臓を回転させます。
小さなバンナハサミで。左心房付属器の2〜3ミリメートルの部分をトリミングして、心房に小さな開口部を作成します。左心房付属器を左カニューレに慎重にカニューレします。
黒いクランプで保持し、2/0シルク縫合糸で結びます。心臓がチャンバーの中心に収まるように、ハートチャンバーウォータージャケットを調整します。次に、圧力トランスデューサーを空気に開きます。
ソフトウェアで大動脈圧を選択します。次に、ブリッジアンプをクリックし、続いてゼロとOKをクリックして圧力トランスデューサをゼロにします。ランゲンドルフモードで心臓を10分間灌流します。
次に、ランゲンドルフのクレブス・ヘンセライト緩衝貯留層からエアストーンを作業中のクレブス・ヘンセライト緩衝貯留層に移します。作業用灌流液から続く三方タップを開きます。大動脈カニューレにつながる大きなクランプを閉じ、左心房付属器につながる流れを開いて作業モードに切り替えます。
作業モードで心臓を15分間灌流します。心臓麻痺チャンバーに50ミリリットルの指定された心臓保存溶液を充填します。ウォータージャケットを下げ、作業モード側の三方タップを閉じます。
クランプを閉じて、左心房カニューレへの流れを止めます。次に、大動脈カニューレへの流れを開きます。次に、ランゲンドルフ側とアフターロードからクランプを閉じます。
心臓麻痺ラインからクランプを開きます。15ミリリットルの心臓麻痺溶液を圧力ラインから洗い流します。.大動脈カニューレを介して心臓を心臓に流し、冠状動脈の廃液を収集します。
3分後、心臓麻痺クランプと大動脈カニューレにつながる小さな青いクランプを閉じます。大動脈カニューレにブルドッグクランプを、左カニューレに別のブルドッグクランプを配置します。心臓カニューレブロックを回路から外し、アイスボックス内の心臓麻痺が入ったビーカーに入れます。
冷静電気保存後に心臓を再灌流するには、冷保存後の心臓肺ブロックを灌流回路に慎重に固定します。.クレブス・ヘンセライト緩衝液を充填した鈍い端の18ゲージシリンジを使用して、カニューレから空気を取り除きます。最初に大動脈カニューレを接続します。
次に、ランゲンドルフ側のチューブクランプを開きます。左のカニューレを再接続し、カニューレから空気が取り除かれたことを確認してから、カニューレを灌流回路に接続します。ランゲンドルフから作業モードに切り替えるまで、作業サイドクランプを閉じたままにします。
毎分14〜22ミリリットルの大動脈の流れは、良好なランゲンドルフの流れをもたらしました。ワーキングモードに切り替えると、毎分少なくとも30ミリリットルの大動脈の流れが心臓の貯蔵を促進しました。良好なベースライントレースにもかかわらず、一部の心臓は長期にわたる低温静的貯蔵後に良好な回復をもたらさなかった。
