まず、麻酔をかけたラットを電気生理学のために準備し、配置します。単相カタルシス矩形波パルスを適用して、横隔神経を刺激してCMAP応答を記録します。反応の振幅の増加が止まるまで、刺激強度を徐々に増やします。
次に、刺激強度を最大限反応させるのに必要なレベルの約120%まで上げて、超最大刺激を確保し、追加の反応を記録します。CMAPのピークツーピーク振幅をミリボルト単位で測定し、文書化します。1ヘルツの周波数で0.1ミリ秒の持続時間で最大以下の刺激を投与します。.
0.03 ミリアンペア刻みで強度を徐々に増やし、応答の増加を引き出し、応答が最小限になるまで、全応答または最小応答なしを実現します。次に、2〜10ミリアンペアの範囲の刺激強度で初期応答を取得します。最初の増分応答を保存した後、0.03ミリアンペアの増分で徐々に高い刺激強度で追加の増分を取得します。
増分応答の最初の負のピークが、最大CMAP応答の負のピークと時間的に整列していることを確認します。横隔膜が呼吸に関与していることを考えると、各増分応答の安定性と分画の欠如を確認して、3 つの重複応答の一貫性を確認します。増分応答をリアルタイムで観察し、それらを以前の録音に重ねて視覚的に区別します。
次に、増分振幅が少なくとも25マイクロボルトであることを確認します。10個のインクリメンタル応答を記録した後、各インクリメントの振幅が最終応答の合計振幅の1/3を超えないことを確認します。SMUP の平均振幅を推定するには、10 刻みの値を平均化します。
次に、最大CMAP振幅を平均SMUP振幅で除算して、MUNEを決定します。胸腔内CTB-SAP注射の7日後、MUNEは、対照ラットの74と比較して、成体ラットの60の機能運動単位に減少しました。CMAPの振幅は比較的安定しており、代償メカニズムとして傍発芽の可能性を示唆しています。
ダイアフラム CMAP、SMUP、および MUNE は、注入後 28 日間にわたって測定されました。CMAPは顕著な変化を示さなかった。CTB-SAPラットのSMUPの平均増加率は約50〜60%であり、変化は経時的に有意であり、CTB-SAPに起因していました。
CTB-SAPラットではMNEが約40%減少し、CTB-SAP治療における時間の影響が有意であることが示されました。