まず、2つの14ミリリットルチューブをAとB、1つの15ミリリットル遠心チューブをC、1つの15ミリリットル遠心チューブを廃棄物としてラベル付けします。全血を遠心分離した後、準備したバフィーコートの1ミリリットルをチューブA.0.1モルEDTAの60マイクロリットルをチューブA.次に磁気ビーズチューブを30秒間ボルテックスします。自動PBMC装置の電源を入れるには、装置の前面で電源を入れます。
機器のホーム画面で、プロファイルを選択し、目的のプロトコルを選択します。次に、開始ボリュームを入力し、サンプルごとに繰り返します。同じ試薬キットを使用するすべての象限を選択します。
次に、ラベル付きの消耗品、フィルターチップ、およびバッファーコンテナを、自動PBMC装置画面の指示に従って、装置のカルーセルの各象限にロードします。ローディングが完了したら、消耗品と試薬から蓋を取り外し、装置画面で[実行]を選択します。実行が完了したら、[アンロード]を選択し、インストゥルメントのカルーセルからサンプルを削除します。
500マイクロリットルの細胞をサンプルカップに移し、希釈なしの細胞数にします。自動ビーズベースの分析法と手動分析法を比較したところ、細胞生存率や総細胞数に有意差は認められませんでした。手動法では 8 つのサンプルを 43 分で処理しましたが、自動法では 57 分かかり、これには 35 分のハンズオフ処理が含まれていました。
平均細胞生存率は、5日以内に処理されたPBMCで90%を超え、10日以内に処理されたPBMCで75%を超えました。PBMCの平均収量は、24時間以内に処理された検体と比較して、5日後に50%減少しました。
