まず、市販のげっ歯類の食品製造業者から葉酸またはコリン欠乏症の飼料を入手してください。特別な食事には、葉酸1キログラムあたり0.3ミリグラム、または酒石酸によるコリン1キログラムあたり300ミリグラムが含まれています。この特別な食事で雌のマウスを4〜6週間維持します。
その後、子孫が母親から離乳したら、葉酸またはコリン欠乏症の食事と対照食に置きます。子孫を安楽死させた後、生化学的分析のために血液サンプルと肝臓組織を採取します。EDTAコーティングされたチューブに血液を追加し、チューブを遠心分離して血漿を分離し、炭素1-代謝物の濃度を決定します。
次に、切断した肝臓組織サンプルを凍結保存チューブに移し、スナップ凍結します。交配前の4週間の対照食、コリン食餌、または葉酸欠乏食を摂取した雌マウスのベースライン体重と週体重は、有意差を示さなかった。葉酸欠乏食を摂取したマウスの血漿中の母体一炭素代謝物濃度は、対照マウスと比較してわずかに低かった。