まず、滅菌済みの手術器具を手術台に並べます。横隔膜筋筋電図(EMG)電極移植の約72時間後、ラットの体重を量ります。ラットに麻酔をかける前に、ラットをボウマンスタイルのケージに入れます。
ワイヤーを慎重に接続し、ラットの背側を出てプリアンプに送り、両側横隔膜筋EMGを記録します。次に、麻酔をかけたラットを腹臥位に置きます。首から耳の高さまで、肩甲骨まで髪を剃ります。
ラットの背中から露出した電極線をアンプに接続します。4%グルコン酸クロルヘキシジンとイソプロピルアルコールを交互に3回皮膚を消毒します。.上部背部を除いて、滅菌済みの手術カバーでラットを覆います。
メスを使用して、4センチメートルの吻尾側切開を行います。皮膚を引っ込めて、肩峰僧筋を切断します。次に、菱形筋を解剖して脊椎筋を露出させます。
手術用顕微鏡で、脊椎筋をC1からC3に切除します。次に、rongeurを使用して、主要な動脈や神経に損傷を与えることなく、C2で椎弓切除術を慎重に行います。C2の硬膜を切断して取り外します。横隔膜筋筋電図をモニタリングしながら、背根が脊髄に入る点のすぐ下に角度解剖ナイフを挿入し、腹面の中点まで完全に切片にします。次に、C2 脊椎半切除が行われた麻酔ラットのユープネック同側横隔膜筋電図活動を記録します。
3-0縫合糸で脊髄筋を縫合し、皮膚切開部を閉じます。水分補給を維持するために、動物の体重50グラムあたり1ミリリットルの生理食塩水を皮下に注射します。ラットを回復のために加熱パッド付きの清潔なケージに入れます。
プリアンプのハイバンドパスフィルターを100ヘルツに、ローパスフィルターを1000ヘルツに設定します。左右の半横隔膜EMGユープネック記録を1〜2分収集した後、さらなる分析のために日付を適切な形式で保存します。C2脊椎半切除の成功例は、損傷後3日目に麻酔下でユープネック同側横隔膜EMG活動がないことを示しました。
覚醒状態での横隔膜筋筋電図活動は、損傷前のベースラインと比較して、ユープネック同側横隔膜の減少を示しました。対側横隔膜筋の筋電図活動は、麻酔をかけた状態と覚醒した状態の両方で増加しました。
