熱帯熱マラリア原虫とソルビトールの同期化によるCDPK1を用いた代償機構の解明に向けたトランスフェクションのためのin vitro培養

まず、熱帯熱マラリア原虫のNF54株を、補充した完全RPMI培地中のO +ヒトRBCの2%ヘマトクリットで培養します。ソルビトール同期のために、室温で3分間、2,300Gの50ミリリットルの円錐管に非同期寄生虫をペレット化する。上清を捨てた後、寄生した赤血球を9容量の5%ソルビトールと摂氏37度で10分間インキュベートします。

インキュベーション後、前に示したように赤血球をペレット化し、ソルビトールを廃棄します。ソルビトール処理された寄生虫を不完全なRPMIおよびAlbuMAXおよび重炭酸ナトリウムを含まないRPMI培地で洗浄します。その後、それらを完全なRPMIでインキュベートして、リングステージの寄生虫を取得します。