熱帯熱マラリア原虫キナーゼ耐性機構の解明のためのcdpk1遺伝子座の所望改変によるトランスジェニック寄生虫のPCR検証

まず、形質転換した熱帯熱マラリア原虫を目的の薬剤で治療します。寄生虫の増殖の2〜3日後、マイクロ遠心チューブ内で500マイクロリットルの培養物を2,400Gで5分間遠心分離します。赤血球を溶解するには、再懸濁した寄生虫1ミリリットルを10マイクロリットルの10%サポニンと摂氏4度で5分間インキュベートします。

細胞を遠心分離した後、上清を捨てて寄生虫ペレットを得ます。寄生虫ペレットを1ミリリットルのPBSで洗浄し、ペレットを50マイクロリットルのDNAseおよびRNAseフリー水に再懸濁します。再懸濁したペレットを摂氏95度で5分間加熱し、摂氏4度で16,200Gで10分間遠心分離します。

寄生虫DNAを含む上清を新しいチューブに移します。