開始するには、大動脈ポートの直前に3 x 8インチのチューブをクランプして、灌流を停止します。準備したブタの心臓を後壁をオペレーターに向け、臓器室を約20度に傾けます。次に、大動脈カニューレを大動脈ポートから90度の角度で配置し、大動脈線をゆっくりとクランプ解除します。
大動脈カニューレを空気を抜いて、灌流液を徐々に流し込みます。次に、大動脈カニューレの角度をゆっくりと小さくして、大動脈ポートと整列し、大動脈ラインに完全に接続します。完全に接続されたら、左心室の充填による膨満を防ぐために、断続的に心臓を優しくマッサージします。
この期間中に、開いた左心房から左心室をベントします。.データ取得を開始し、毎分333マイクロリットルでアデノシン点滴を開始します。次に、ペーシングワイヤーをペーシングボックスに接続し、バックアップペーシングのために毎分60ビートに設定します。
細動がある場合は、30個のJUULパドルを使用して心臓を除細動します。整然としたリズムが見られるようになったら、手動ベントを中止し、フック針を使用して心電図リードを直接心臓に配置します。直角カニューレを臓器室の心房ポートに接続します。
接続したら、カニューレをクランプし、酸素供給器とローディングリザーバーの間のラインでホフマンクランプを解放して、液体をローディングリザーバーに流入させます。次に、圧力が15〜20ミリメートルの水銀柱に達するまで、ローディングリザーバーを満たします。ポンプの出力を増やして、大動脈圧と心房圧の両方を維持します。
次に、直角金属チップの半分を左心房に挿入し、先端が付属器を向くようにして、僧帽弁の能力を促進します。左心室内に圧力センサーを挿入して、左心室圧を記録します。その後、カニューレのクランプを解放して、左心房が満たされるようにします。
空気が抜けたら、前に配置した縫合糸と止血帯のスネアを使用して、左側の心房の開口部を完全に閉じます。必要に応じてカニューレとスネアを調整し、液体の漏れを最小限に抑えます。カニューレを左心房に固定した後、酸素供給器からウィンドケッセルバッグまでのラインをクランプして、大動脈への逆行性灌流を完全に停止します。
最後に、アデノシン点滴をウィンドケッセルバッグにつながるラインからローディングリザーバーと心房ポートの間のラインに移動します。血管抵抗性、酸素摂取率、乳酸蓄積、グルコース消費、カリウム蓄積は、灌流期間を通じて統計的な差を示さなかった。同様に、移植片によって増加した重量にも違いは見られませんでした。
しかし、失敗した移植片の心拍数は、負荷時間の 2 時間後に着実に低下し、曲線の下の領域は 3 時間の灌流まで統計的に有意な差を示しませんでした。さらに、負荷に依存する指標は、負荷時間の30分という早い時期に心機能の喪失を示唆しており、収縮性の測定値は機能の喪失を示す最初の指標でした。心拍数と同様に、左心室脈圧は負荷がかかった灌流の2時間後に着実に低下し、移植片、脈圧、および弛緩の間には1.5時間の灌流後に統計的に有意な差が見られました。