まず、in vitro組織灌流システムをオンにします。機器の浴温度を摂氏37度に調整します。次に、摂氏37度の生理的塩溶液(PSS)を浴に入れます。
15cmの外科用縫合糸を準備し、95%の酸素と5%の二酸化炭素で飽和した摂氏4度のPSSに浸します。腸管の一方の端を縫合糸で固定し、もう一方の端をスチール製のニードルフックを使用して固定します。次に、腸管を取り付けます。
バスの底にスチール製のニードルフックでセグメントを取り付け、手術ラインのもう一方の端をトランスデューサーに取り付けます。ガススイッチをONにして、お風呂に気泡が出るようにします。次に、データ集録ソフトウェアを開き、[開始]をクリックして、対応するパス信号が記録されていることを確認します。
バスのらせん軸を反時計回りに回転させて、腸管を自然な状態にリラックスさせます。[Setup]、[Zero All Inputs]の順にクリックし、ソフトウェアが腸管の初期張力をゼログラムに設定していることを確認します。次に、バスのスパイラル軸を時計回りに回転させて張力値を1グラムに引き、摂氏37度のPSSで30分間安定させます。
ソフトウェアでリズミカルな自発的な収縮波を観察し、これは十分な応答を示しています。次に、試験薬をお風呂に加えて、腸管機能への影響を調べます。その後、データ集録ソフトウェアを停止し、ソフトウェアを使用してデータ解析を行ってください。
データボードを編集して解析パラメータを選択するには、[Window]、[Data Pad]の順にクリックし、チャンネルの平均張力を選択します。管理前に収縮曲線を選択し、データパッドに追加をクリックします。次に、管理後の収縮曲線を選択し、[データ パッドに追加] をクリックします。
投与前後の平均張力値が順番にデータパッドに表示されます。次に、[ウィンドウ]、[データパッド]をクリックして、データを他の統計分析ソフトウェアにコピーし、さらに分析します。平均振幅、平均周波数、曲線の下の積分面積などの他のパラメーターを解析します。
平均張力をそれぞれのパラメータに置き換えます。その後、曲線を選択します。[編集]、[LabChart データのコピー] の順にクリックし、データを描画ソフトウェアにコピーして視覚化します。
この研究では、分離された腸管リングの張力に対するさまざまな薬剤の影響を調べました。アセチルコリンは、これらのチューブの張力を大幅に高めました。逆に、アトロピンはアセチルコリンによって引き起こされる緊張を抑制しました。
同様に、塩化バリウムも張力を高めました。一方、エピネフリンとニフェジピンの両方が、孤立した腸管輪の緊張を抑制しました。
