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Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans

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出芽酵母の培養とメンテナンス

概要

出芽細胞を用いた研究により、細胞周期の制御、老化、細胞死などの重要な細胞内メカニズムの理解が深まっています。酵母は、低コストで培養できる、そのまますぐに使用可能な株が簡単に入手できる、などの利点が挙げられます。しかし一方で、適切なメンテナンスが実験成功への鍵となります。

このビデオでは、研究室での出芽酵母の培養、メンテナンス方法の概要をお伝えすると共に、分光光度計を用いた増殖曲線の作成方法など、酵母の増殖をモニタリングするときに必要な基本概念についても説明しています。さらに、研究室での酵母のメンテナンスに要求される実践的なテクニック、具体的には培地の準備、酵母細胞の培養の始め方、そしてその保管方法、についてもご覧いただけます。そして最後に、これら操作方法やメンテナンス技術の基礎研究への応用について紹介しています。

手順

出芽酵母での 細胞周期制御機構や テロメラーゼ活性、オートファジー が発見され、酵母が研究に有益であることが分かりました。 酵母は増殖させやすく、酵母プラスミドや酵母株は市販されており簡単に入手できます。 低価格で酵母の培養ができますが、酵母のメンテナンスが何より実験成功への鍵となります。 これから、研究室でどのように出芽酵母が培養され、メンテナンスされているか見ていきましょう。

生物学では、一定期間における菌数の変化を増殖曲線で表します。 酵母の増殖曲線は、600ナノメートルで測定した光学濃度、ODをy軸に、時間をx軸にプロットし作成します。 光学濃度は一般に吸光度と呼ばれ、酵母浮遊液を通過する光の透過率の対数で表されます。 特定波長の吸光度の測定には分光光度計を用います。

酵母株の増殖曲線は、異なる時間間隔で吸光度を測定し算出します。 酵母増殖曲線は誘導期、指数増殖期、静止期の3つのフェーズに分かれています。 誘導期には、環境に適応し、成長しますが分裂はしません。 指数増殖期には、活発に分裂し細胞が倍増します。 そして栄養分が枯渇する

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Overview

0:51

Calculating the Doubling Time with the Yeast Growth Curve

2:56

Media Preparation

4:09

Growing Yeast

5:46

Storage

6:30

Applications

8:03

Summary

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