Name: switchable acoustic and optical resolution photoacoustic microscopy for in vivo small-animal blood vasculature imaging
Uploaded: 2017-06-26T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 17 s
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著者は、シンガポールの教育省（ARC2 / 15：M4020238）が資金を提供するTier 2助成金からの財政的支援を認めたいと考えています。著者は機械ショップの助けを借りてChow Wai Hoong Bobbyに感謝したいと思います。

すべての動物実験は、シンガポール南陽技術大学の動物実験および使用委員会（Animal Protocol Number ARF-SBS / NIE-A0263）の認可された規制およびガイドラインに従って行われた。 AR-OR-PAMシステム（ 図1 ） <ol><li> システム構成：AR-PAM <ol><li>ダイオード励起、固体状態のNd-YAGレーザー（532 nm）と、光照射源として559〜576 nmの可変範囲を有する色素レーザーからなるナノ秒の可変レーザーシステムを使用する。外部コントローラを使用してレーザー波長を570 nmに設定し、レーザーソフトウェアを使用してレーザーの繰り返し速度を1 kHzに設定します。 </li><li>ビームサンプラーをレーザーの前に45°の角度で置き、可変中性密度フィルター（NDF1; OD = 0-4.0）を介してレーザー出力の5％をフォトダイオードにそらす。 </li><li>ビームサンプラーの後で90°でレーザービームを方向転換する直角プリズム（RAP1）である。 </li><li>別の直角プリズム（RAP2）を使用して、可変中性密度フィルター（NDF2; OD = 0-4.0）とマルチモードファイバー（MMF）を通過させ、ファイバーカプラー（FC）-a対物レンズの組み合わせ（開口数（NA）：0.25）およびXYトランスレータ。 </li><li> XYトランスレータを使用して、ファイバを走査ステージに固定します。ファイバー出力端から25 mm離れた平凸レンズ（L1）を置き、ファイバーからビームをコリメートします。 </li><li>コリメートされたビームを頂角130°の円錐レンズに通して、リング状のビームを生成する。コーンアングル70°と110°の自家製光学コンデンサー（OC）を使用し、中心に穴をあけて、リング状のビームを被写体に弱く集中させます。 </li><li>ホームメイドコンデンサーの中央に音響レンズ（AL）付きの50 MHz超音波トランスデューサー（UST）を置きます。 </li></ol></li><li> システム構成：OR-PAM <ol><li>使うダイオード励起、固体状態のNd-YAGレーザ（532nm）と、559〜576nmの可変範囲を有する色素レーザとからなるナノ秒可変レーザシステムを光照射源として使用する。外部コントローラを使用してレーザー波長を570 nmに設定し、レーザーソフトウェアを使用して5 kHzでレーザーの繰り返し速度を設定します。 </li><li>コンピュータ制御の回転ステージ（RAP1を保持）を90°回転させて、レーザービームをアイリス上に向けて整形し直します。 </li><li>可変中性密度フィルター（OD：0〜4.0）をビームに沿って配置し、集光レンズ（CL）でビームを集束させるレーザービームを減衰させます。空間フィルタリングのためにCLから75 mm離れたピンホール（PH）に通してください。 </li><li> SMFに光ビームを集束させるための0.1NAの対物レンズからなるシングルモードファイバーカプラー（FC）を使用して、空間的にフィルターされたビームをシングルモードファイバー（SMF）に照射します。 </li><li>ファイバーカプラーを調整して最大の結合効率を達成してください。 </li><li>ファイバをtに固定します。スリッププレート（SP）を用いてステージを走査する。レーザ光をコリメートするために、無色レンズ（L2）をSMファイバから50mm離して置きます。 </li><li>別の同一の色消しレンズ（L3）の背面開口部を満たすために、キネマティックに制御可能な楕円鏡（M）を使用して、平行化されたビームを90°に向けてください。レンズチューブ（LT）を使用して、焦点合わせに使用する色消しレンズを平行移動マウント（TM2）に置きます。 </li><li>集束ビームを直角プリズム（RA）と菱形プリズム（RP）からなる手作りの光音響ビーム結合器に通し、その間にシリコンオイル（SO）の層を置きます。 注：シリコンオイル層は、光学的に透明で音響的に反射する膜として機能します。 </li><li>菱形プリズムの底面に音響レンズ（AL）を取り付けて、音響焦点（焦点直径：約46μm）を与えます。 </li><li>菱形プリズムの上に50MHzの中心周波数を持つ超音波トランスデューサを置く。効果的な結合のためにエポキシ層を使用する。 </li></ol></li></ol&gt; 2.システムの切り替えとアライメント<ol><li>手作りの切り替え可能なプレートを、コンピュータに接続された3軸コントローラによって制御される3軸電動ステージに固定する（しっかりとねじ込む）。 </li><li>ケージ取り付けブラケットを使用して自家製プレートにARおよびORケージシステムを取り付けると、ARおよびORスキャンヘッドを簡単に切り替えることができます。スキャンヘッドをイメージング領域の上にスライドさせます。 </li><li> AR-OR-PAMスキャナーヘッドの底部を水で満たされたアクリル製タンク（13 cm x 30 cm x 3 cm）に浸して音響結合します。 </li><li>タンクの底板に直径7cmの画像ウィンドウを開き、光学的および音響的伝達のためにポリエチレン膜でシールします。 </li><li> パルスエコーアンプとオシロスコープを使用して、超音波トランスデューサの焦点を合わせます。 <ol><li>送信/受信モードでパルスエコーアンプのゲインを24 dbに設定します。 </li><li>同期アウト信号frを使用するオシロスコープをトリガとし、オシロスコープを使用してスライドガラス（水槽の底部から挿入）から後方散乱信号を検出します。 注：スライドには黒いテープが貼られているはずです。 </li><li> Z軸を動かして、パルスエコー信号の振幅を最大にします（オシロスコープで表示）。 注：ガラス板にフォーカスがあると、エコーの振幅は最大になります。 </li></ol></li><li>レーザーのスイッチを入れ、BNCケーブルを使用してUSTを2つのアンプに接続し、それぞれ24dBの固定ゲインを接続します。 注：アンプの出力はデータ集録カード（DAQ）に接続されています。 </li><li>レーザーの前面にあるフォトダイオード（PD）からの信号を、データ集録システムのトリガーとして使用します。 </li><li> AR-PAMでは、円錐レンズ（con.L）と光凝縮器（OC）の距離を変えて、試験対象から生成された光音響信号の振幅を最大化します（ガラススライド上に黒いテープが貼り付けられます）。最大光音響（PA）信号振幅を決定することにより、光学焦点と音響焦点が共焦点であることを確認します。 <ol><li>最大PA信号の遅延に注意してください。これを後で使用して、データ集録ソフトウェアの焦点を確認してください。 </li></ol></li><li>スキャンヘッドのネジを緩め、スキャンヘッドを手動でAR-PAMからOR-PAMに切り替えます。次に、ネジを締めます。 </li><li> OR-PAMでは、オシロスコープに表示されているPA信号の振幅を最大にするために、収束する無彩色ダブレット（レンズチューブ（LT）の内側）とオプトアコースティックコンバイナの間の距離を変えます。 <ol><li>最大PA信号の遅延に注意してください。 注：共焦点配置を決定するには、細分化が必要です。 </li></ol></li></ol> 3.実験ステップ<ol><li> 横方向分解能および画像深さ定量化 <ol><li>直径100ナノメートルの金ナノ粒子を使用して、ARの側方分解能を決定する。d ORシステム。 </li><li>等量の水で0.1mLのナノ粒子溶液を希釈する。カバースリップ上に0.1 mLの希釈溶液を分配し、タンクの下のポリエチレンメンブレンに接触させて置きます。 </li><li>スキャンの前に、AR-PAMとOR-PAMがデータ収集ソフトウェア（表の表を参照）に焦点を合わせていることを確認します（ステップ2.8と2.10）。 注：サンプリングレート（250 MS / s）を掛けた2.9と2.10のステップからの最大PA信号のマイクロ秒の遅延を知ることによって、画像はデータ収集ソフトウェアでフォーカスされます。データ取得中に省略しなければならない遅延は、後処理のために必要なデータポイントのみを保存するようにソフトウェアで決定することができる。 </li><li> AR-PAMのスキャンパラメータを設定し、「スキャン」ボタンを押してラスタスキャンを開始します。 <ol><li>データ収集ソフトウェアのAR-PAMのスキャンパラメータを「速度」の「4」mm / sスキャン速度で設定します。; 「パルス繰返し率」タブでは「1」kHz、「Yスキャン範囲」タブでは「0.5」mm、「Xスキャン範囲」タブでは「0.5」mmである。 dxタブのx方向のステップサイズを &quot;4&quot;μmに設定します。 注：y方向のステップサイズは、ステージのスキャン速度速度とパルス繰り返し速度（この場合、4,000μm/ 1,000 Hz = 4μm）から自動的に決定されます。 </li></ol></li><li> OR-PAMのスキャンパラメータを設定し、「スキャン」ボタンを押してラスタスキャンを開始します。 <ol><li>データ収集ソフトウェアのスキャンパラメータを「速度」タブの「2.5」mm / sスキャン速度、「パルス繰り返し速度」タブの「5」kHz、「Yスキャン範囲」の「0.5」mm、タブ、「Xスキャン範囲」タブでは「0.5」mmです。 「dx」タブで、x方向のステップサイズを「0.5」μmに設定します。 注：sステージの走査速度速度とパルス繰返し速度（この場合2,500μm/ 5,000Hz =0.5μm）からy方向のテップサイズが自動的に決定されます。 </li></ol></li><li>スキャン処理中に、データが継続的にキャプチャされ、コンピュータに保存されていることを確認します 注：データは、Yステージの1つの移動方向にのみキャプチャされます。 </li><li>コンピュータに保存された複数のBスキャンデータを使用して、画像処理ソフトウェア（ 表の表を参照）を使用して最大振幅投影（MAP）画像を検索します。 </li><li>走査からの単一のナノ粒子画像（複数の画像のうちの1つ）を使用して、ナノ粒子画像の中央領域を通る線を手動でプロットして横方向の解像度を決定し、ガウス曲線のような点広がり関数を得る。 図2を参照してください。 </li><li> Gauを用いて単一のナノ粒子画像から得られた点広がり関数を適合させる画像処理ソフトウェア（ 表の表を参照）を使用して半値全幅（FWHM）を測定します。これを横方向の解像度として使用します。 図2を参照してください。 </li><li>奥行き画像のためのターゲットオブジェクトとしてスライスチキンティッシュの一部に斜めに黒いテープを挿入します。水タンクにテープ付きのティッシュを置きます。 注：黒いテープは、組織にテープを取り付けるのを助ける、鋭い先端を備えた金属プレートに貼り付けられています。 </li><li> AR-PAMのスキャンパラメータをデータ収集ソフトウェアに設定し、「スキャン」ボタンを押して単一のBスキャン画像をキャプチャして最大画像深度を決定します。 <ol><li> 「速度」タブでは「15」mm / s、「パルス繰返し率」タブでは「1」kHz、「Yスキャン範囲」タブでは「5」cm、 &quot;mm&quot;を &quot;Xスキャン範囲&quot;タブに表示します。セットする「dx」タブの「0.1」mmでのx方向のステップサイズ。 </li></ol></li><li> OR-PAMのスキャンパラメータを設定し、「スキャン」ボタンを押して単一のBスキャン画像をキャプチャし、最大イメージング部を決定します。 <ol><li> &quot;速度&quot;タブでは &quot;15&quot; mm / sのスキャン速度、 &quot;パルス繰り返し率&quot;タブでは &quot;5&quot; kHz、 &quot;Yスキャン範囲&quot;では &quot;2&quot; cmとデータ収集ソフトウェアのスキャンパラメータを設定します。 「Xスキャン範囲」タブでは「0.1」mmとなります。 「dx」タブのx方向のステップサイズを「0.1」mmに設定します。 注：Xスキャン範囲とdxは同じであるため、1つのBスキャンしかキャプチャされません。時間分解されたPA信号に軟組織の音速（1,540m / s）を乗じると、Aライン画像が得られます。 Yステージの連続動作中に複数のAラインが捕捉されてBスキャンが生成される。 </li></ol></li></ol></li><li> インビボで&lt;/ em&gt;マウス耳血管系のイメージング<ol><li>体重25g、年齢4週の雌マウスを使用する。 </li><li>ケタミン（120mg / kg）およびキシラジン（16mg / kg）のカクテルを腹腔内注射（0.1mL / 10g投与）して動物を麻酔する。 </li><li>脱毛クリームを使用して動物の耳から毛を取り除く。エリアをきれいに拭きます。散乱したレーザービームが眼に当たるのを避けるために、動物の目を滅菌眼軟膏で覆う。 </li><li>耳を置くためのミニプレートもあるステージ上に動物を置く。 </li><li>撮影期間中、吸入イソフルラン（1L /分酸素で0.75％）で麻酔を維持する。 </li><li>脈拍オキシメーターをマウスの脚または尾に締め付け、生理的状態をモニターする。超音波ゲルを用いてイメージング領域をポリエチレン膜と接触させる。 </li><li> AR-PAMのスキャンパラメータを設定し、「スキャン」ボタンを押してラスタスキャンを開始しますing。 <ol><li>データ収集ソフトウェアのAR-PAMのスキャンパラメータを「速度」タブの「15 mm / s」スキャン速度、「パルス繰り返し速度」タブの「1 kHz」、「パルス繰り返し速度」タブの「10 mm」、 「Yスキャン範囲」タブ、および「6スキャン」範囲タブの「6」mmである。 「dx」タブで、x方向のステップサイズを「30」μmに設定します。 注：y方向のステップサイズは、ステージのスキャン速度速度とパルス繰返し速度（この場合、15,000μm/ 1,000 Hz = 15μm）から自動的に決定されます。 </li></ol></li><li> AR-PAMスキャンが終了したら、イメージングヘッドの位置をAR-PAMからOR-PAMに切り替えます（セクション2を参照）。 </li><li> OR-PAMのスキャンパラメータを設定し、「スキャン」ボタンを押してラスタスキャンを開始します。 <ol><li>データ収集ソフトウェアのOR-PAMのスキャンパラメータを「15mm / sスキャン速度」の「速度「Yスキャン範囲」タブでは「10」mm、「Xスキャン範囲」タブでは「6」mmとすることができる。 x方向に「dx」タブの「6」μmと表示されます。 注：y方向のステップサイズは、ステージのスキャンスピードとパルス繰り返しレート（この場合、15,000μm/ 5,000 Hz = 2μm）から自動的に決定されます。 </li></ol></li><li>コンピュータに保存された複数のBスキャンデータを使用して、画像処理ソフトウェアを使用してMAP画像を検索します。 </li><li>撮影期間全体を通して動物を観察する。 </li></ol></li></ol>

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V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrated+optical-and+acoustic-resolution+photoacoustic+microscopy+based+on+an+optical+fiber+bundle.">Integrated optical-and acoustic-resolution photoacoustic microscopy based on an optical fiber bundle.</a> Opt Lett. 38 (1), 52-54 (2013).</li><li>Estrada, H., Turner, J., Kneipp, M., Razansky, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+optoacoustic+brain+microscopy+with+hybrid+optical+and+acoustic+resolution.">Real-time optoacoustic brain microscopy with hybrid optical and acoustic resolution.</a> Laser Phys Lett. 11 (4), 045601 (2014).</li><li>Jeon, S., Kim, J., Kim, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+switchable+optica-+and+acoustic+-+resolution+photoacoustic+microscopy.">In vivo switchable optica- and acoustic - resolution photoacoustic microscopy.</a> Proc SPIE. , 970845 (2016).</li><li>Song, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fully+integrated+reflection-mode+photoacoustic,+two-photon,+and+second+harmonic+generation+microscopy+in+vivo.">Fully integrated reflection-mode photoacoustic, two-photon, and second harmonic generation microscopy in vivo.</a> Sci Rep. 6, 32240 (2016).</li><li>Park, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delay-multiply-and-sum-based+synthetic+aperture+focusing+in+Photoacoustic+microscopy.">Delay-multiply-and-sum-based synthetic aperture focusing in Photoacoustic microscopy.</a> J Biomed Opt. 21 (3), 036010-10 (2016).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ANSI+Standard+Z136.1-2000.">ANSI Standard Z136.1-2000.</a> American National Standard for Safe Use of Lasers. , (2000).</li><li>Moothanchery, M., Pramanik, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performance+Characterization+of+a+Switchable+Acoustic+Resolution+and+Optical+Resolution+Photoacoustic+Microscopy+System.">Performance Characterization of a Switchable Acoustic Resolution and Optical Resolution Photoacoustic Microscopy System.</a> Sensors. 17 (2), 357 (2017).</li></ol>

すべての動物実験は、シンガポール南陽技術大学の動物実験および使用委員会（Animal Protocol Number ARF-SBS / NIE-A0263）の承認されたガイドラインおよび規制に従って行われた。著者は、原稿に関連する金銭的関心はなく、開示する可能性のある他の利益相反はない。

結論として、より低いイメージング深度で高解像度イメージングとより高いイメージング深度で低解像度イメージングの両方を達成できる切り替え可能なARおよびOR PAMシステムが開発された。切り換え可能なシステムの横方向分解能および画像深度が決定された。この切り替え可能なPAMシステムの利点は、（1）きつい光学的集束を使用する高解像度イメージング、 （2）音響集束を用いた深?...

光干渉断層撮影法、共焦点顕微鏡法、および多光子顕微鏡法などの高分解能光画像化様式は、多数の利点を有する。しかしながら、空間分解能は、撮像深度が増加するにつれて著しく減少する。これは、軟組織1,2における光輸送の拡散性のためである。光励起と超音波検出の統合は、深部組織における高解像度光学イメージングの課題を克服する解決策を提供する。光音響顕微鏡（PAM）は、他の光学イメージング様式よりも深いイメージングを提供することができるそのような様相の1つである。これは、インビボの構造的、機能的、分子的および細胞イメージングに首尾よく適用されている3,4,5,6,7,8 </sup強い光学吸収コントラストと超音波からの高空間分解能とを組み合わせることにより、 &gt; 9,10,11,12,13の研究を行った。 PAMでは、短いレーザーパルスが組織/試料を照射する。発色団（ 例えば、メラニン、ヘモグロビン、水など ）による光の吸収は、温度上昇をもたらし、その結果、音響波（光音響波）の形態の圧力波が生成される。生成された光音響波は、組織境界外の広帯域超音波変換器によって検出することができる。弱い光学的およびタイトな音響集束を利用して、深部組織撮像は音響解像度光音響顕微鏡（AR-PAM）14,15,16において達成することができる。 ARでは-PAM、45μmの横方向分解能、3mmまでの撮像深度が実証されている15 。単一毛細管（約5μm）を音響的に解決するためには、&gt; 400MHzの中心周波数で動作する超音波トランスデューサが必要である。このような高い周波数では、侵入深さは100μm未満である。タイトな光学的集束を使用して、密着した音響集束によって生じる問題を解決することができる。光学的解像度光音響顕微鏡法（OR-PAM）は、単一の毛細血管または単一の細胞17を分解することができ、0.5μmの横方向分解能は18,19,20,21,22,23,24に達している。フォトニックナノジェットの使用は、回折限界解像度以上の解像度を達成するのに役立ちますn 25,26 。 OR-PAMでは、光の集束のために侵入深さが制限され、生物組織23の内部で約1.2mmまで撮像することができる。従って、AR-PAMはより深く、より低い解像度で画像を形成することができ、OR-PAMは、非常に高い解像度で画像化することができるが、画像深度は限られる。 AR及びOR-PAMシステムの画像化速度は、主として、レーザ光源27のパルス繰り返し速度に依存する。 AR-PAMとOR-PAMを組み合わせることは、高解像度と深い画像の両方を必要とするアプリケーションに大きな利点となります。これらのシステムを組み合わせるための努力はほとんどなされていない。通常、2つの異なるイメージングスキャナがイメージングに使用され、これはサンプルが両方のシステム間を移動することを必要とし、したがってインビボイメージングを実行することを困難にする。しかしながら、AR及びOR PAMの両方を用いたハイブリッド撮像は、スケーラブルな解像度深さ。 1つのアプローチでは、ARおよびOR PAMの両方の光を送達するために光ファイババンドルが使用される。このアプローチでは、2つの別々のレーザー（ARの場合は570 nmの高エネルギーレーザーとORの場合は532 nmの低エネルギー、高繰り返しレーザー）が使用され、システムが不便で高価になります。 OR-PAMレーザーの波長は固定されており、酸素飽和度などの多くの研究は、この複合システムを使用しては不可能です。 ARとOR PAMとの比較研究は、ARとORとの間のレーザ波長の違いのためにも不可能である。さらに、AR-PAMは明視野照明を使用する。したがって、皮膚表面からの強い光音響信号が画質を制限する。このため、このシステムは多くのバイオイメージングアプリケーションには使用できません。 ARおよびOR PAMを実行する別の手法では、光学的および超音波的な焦点がシフトされ、光の焦点および超音波の焦点の位置合わせが不整合になる。したがって、画質は最適ではない<sup class = &quot;xref&quot;&gt; 29。この技術を使用すると、AR-PAMおよびOR-PAMは、それぞれ139μmおよび21μmの分解能しか達成できず、分解能の低いシステムになります。光ファイバーとコリメート光学系を変更することを含むもう1つのアプローチは、ARとOR PAMの間で切り替えることが報告されています。これらのすべての場合において、AR-PAMは暗視野照明を使用しなかった。暗視野照明の使用は、皮膚表面からの強い光音響信号の生成を低減することができる。したがって、深い光音響信号の検出感度が明視野照明の検出感度に比べて高いので、リング状照明を用いて深部組織撮像を行うことができる。 この研究は、両方の嚢に対して同じレーザーとスキャナーを使用して、同じサンプルの高分解能イメージングと低分解能深部組織イメージングの両方が可能な切り替え可能なARおよびOR PAM（AR-OR-PAM）イメージングシステムを報告していますems。 AR-OR-PAMシステムの性能は、ファントム実験を用いて空間分解能および画像深度を決定することによって特徴付けられた。 インビボでの血液血管造影画像をマウスの耳に対して実施して、その生物学的イメージング能力を実証した。

<table><tbody><tr><td>Q-switched Nd:YAG laser</td><td>Edgewave</td><td>BX80-2-L</td><td>Pump laser&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Credo-High Repetition Rate Dye Laser</td><td>Spectra physics</td><td>CREDO-DYE-N</td><td>Dye laser</td></tr><tr><td>Precision Linear Stage</td><td>Physik Instrumente</td><td>PLS 85&amp;nbsp;</td><td>XY raster scanning stage</td></tr><tr><td>Translation stage</td><td>Physik Instrumente</td><td>VT 80&amp;nbsp;</td><td>Confocal determine</td></tr><tr><td>Mounted Silicon photodiode</td><td>Thorlabs</td><td>SM05PD1A</td><td>Triggering/Pulse variation</td></tr><tr><td>Motorized continuous Rotational stage&amp;nbsp;</td><td>Thorlabs</td><td>CR1/M-Z7</td><td>Diverting laser beam</td></tr><tr><td>Mounted Continuously Variable ND Filter</td><td>Thorlabs</td><td>NDC-50C-4M</td><td>Intensity variable</td></tr><tr><td>Fiber Patch Cable</td><td>Thorlabs</td><td>M29L01</td><td>Multimode fiber</td></tr><tr><td>Microscope objective</td><td>Newport</td><td>M-10X</td><td>Objective&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>XY translating mount</td><td>Thorlabs</td><td>CXY1</td><td>Translating mount</td></tr><tr><td>Plano convex lens</td><td>Thorlabs</td><td>LA1951</td><td>Collimating lens</td></tr><tr><td>Conical lens&amp;nbsp;</td><td>Altechna</td><td>APX-2-B254</td><td>Ring shape beam</td></tr><tr><td>Translation stage</td><td>Thorlabs</td><td>CT1</td><td>Translating stage</td></tr><tr><td>Optical condenser</td><td>Home made</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ultrasonic transducer</td><td>Olympus-NDT</td><td>V214-BB-RM</td><td>50MHz transducer</td></tr><tr><td>Plano concave lens</td><td>Thorlabs</td><td>LC4573</td><td>Acoustic lens</td></tr><tr><td>Pulser/Receiver</td><td>Olympus-NDT</td><td>5073PR</td><td>Pulse echo amplifier&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Mounted standard iris</td><td>Thorlabs</td><td>ID12/M</td><td>Beam shaping</td></tr><tr><td>Plano convex lens</td><td>Thorlabs</td><td>LA4327</td><td>Condenser lens</td></tr><tr><td>Mounted precision pinhole</td><td>Thorlabs</td><td>P50S</td><td>Spatial filtering</td></tr><tr><td>Single mode fiber patch cable</td><td>Thorlabs</td><td>P1-460B-FC-1</td><td>Single mode fiber</td></tr><tr><td>Fiber coupler</td><td>Newport</td><td>F-91-C1</td><td>Single mode coupling</td></tr><tr><td>Achromatic doublet lens</td><td>Edmund Optics</td><td>32-317</td><td>Achromatic doublet</td></tr><tr><td>Protected silver elliptical mirror</td><td>Thorlabs</td><td>PFE10-P01</td><td>Mirror</td></tr><tr><td>Right angle kinematic mirror mount</td><td>Thorlabs</td><td>KCB1</td><td>Mirror mount</td></tr><tr><td>Z-Axis Translation Mount</td><td>Thorlabs</td><td>SM1Z</td><td>z translator</td></tr><tr><td>Lens tube</td><td>Thorlabs</td><td>SM05L10</td><td></td></tr><tr><td>UV Fused Silica Right-Angle Prism</td><td>Thorlabs</td><td>PS615</td><td>Right angle prism</td></tr><tr><td>Rhomboid prism</td><td>Edmund Optics</td><td>47-214</td><td>Shear wave</td></tr><tr><td>Dimethylpolysiloxane</td><td>Sigma Aldrich</td><td>DMPS1M</td><td>Silicon oil</td></tr><tr><td>Amplifier</td><td>Mini Circuits</td><td>ZFL-500LN</td><td>Amplifier</td></tr><tr><td>16 bit high speed digitizer</td><td>Spectrum</td><td>M4i.4420</td><td>Data acquisition card</td></tr><tr><td>Oscilloscope</td><td>Agilent Technologies</td><td>DS06014A</td><td></td></tr><tr><td>Mice&amp;nbsp;</td><td>InVivos Pte.Ltd</td><td>ICR</td><td>Animal model</td></tr><tr><td>Ultrasound gel&amp;nbsp;</td><td>Progress/parker acquasonic gel</td><td>PA-GEL-CLEA-5000</td><td>Acoustic coupling</td></tr><tr><td>Water tank</td><td>Home made</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Translation stage</td><td>Homemade</td><td></td><td>Switching AR-OR</td></tr><tr><td>Gold nanoparticles</td><td>Sigma Aldrich</td><td>742031</td><td>Lateral resolution</td></tr><tr><td>Sterile ocular ointment</td><td>Alcon</td><td>Duratears</td><td>Animal imaging</td></tr><tr><td>1951 USAF resolution test target</td><td>Edmund Optics</td><td>38257</td><td>Confocal alignment</td></tr><tr><td>Data acquisition software</td><td>National Instrument</td><td>Labview</td><td>Home made software using Labview</td></tr><tr><td>Image Processing software</td><td>Mathworks</td><td>Matlab</td><td>Home made program using Matlab</td></tr></tbody></table>

switchable acoustic and optical resolution photoacoustic microscopy for in vivo small-animal blood vasculature imaging

光音響顕微鏡法（PAM）は、オプティクスと超音波の両方を組み合わせた高速成長型のインビボイメージングモダリティであり、光学的平均自由行程（肌で1mm以下）を超えて高分解能で侵入します。単一のモダリティで超音波の高空間分解能と光吸収コントラストを組み合わせることにより、この技術は深部組織に浸透することができます。光音響顕微鏡検査システムは、音響分解能が低く、プローブが深く、または光学分解能が高く、プローブが浅くてもよい。単一のシステムで高い空間分解能と深度の浸透を達成することは困難です。この研究は、浅い深度での高解像度イメージングとインビボでの同じサンプルの低解像度深部組織イメージングの両方が可能なAR-OR-PAMシステムを提示する。光学集束を用いた1.4mmの撮像深度を有する4μmの横分解能と、音響集束を用いた7.8mmの撮像深度を有する45μmの横分解能が成功した組み合わせたシステムを使って実証されました。ここで、生体内での小動物の血管系画像化を行って、その生物学的イメージング能力を実証する。

AR-OR-PAMシステムの概略図を図1に示します 。このセットアップでは、すべてのコンポーネントが光学ケージの設定で統合され、組み立てられました。ケージシステムを使用することにより、AR-OR-PAM走査ヘッドがコンパクトになり、単一の走査ステージ上に容易に組み立てられ、位置合わせされ、一体化される。 <p class="j...

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Switchable Acoustic and Optical Resolution Photoacoustic Microscopy for In Vivo Small-animal Blood Vasculature Imaging

ここでは、インビボで同じ試料上の浅い深度での高分解能画像化と低分解能深部組織画像化の両方が可能な切り替え可能な音響分解能（AR）および光学分解能（OR）光音響顕微鏡法（AR-OR-PAM）

切り替え可能な音響光学分解能光音響顕微鏡<em&gt;インビボ</em&gt;小動物の血管系イメージング

Photoacoustic microscopy (PAM) is a fast-growing invivo imaging modality that combines both optics and ultrasound, providing penetration beyond the ...

switchable-acoustic-optical-resolution-photoacoustic-microscopy-for

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Switchable Acoustic and Optical Resolution Photoacoustic Microscopy for In Vivo Small-animal Blood Vasculature Imaging

11.8K ビュー.  Nanyang Technological University. ここでは、インビボで同じ試料上の浅い深度での高分解能画像化と低分解能深部組織画像化の両方が可能な切り替え可能な音響分解能（AR）および光学分解能（OR）光音響顕微鏡法（AR-OR-PAM） 

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Three-dimensional Optical-resolution Photoacoustic Microscopy

Optical microscopy, providing valuable insights at the cellular and organelle levels, has been widely recognized as an enabling biomedical technology. As the mainstays of in vivo three-dimensional (3-D) optical microscopy, single-/multi-photon fluorescence microscopy and optical coherence tomography (OCT) have demonstrated their extraordinary sensitivities to fluorescence and optical scattering contrasts, respectively. However, the optical absorption contrast of biological tissues, which encodes essential physiological/pathological information, has not yet been assessable. 
The emergence of biomedical photoacoustics has led to a new branch of optical microscopy optical-resolution photoacoustic microscopy (OR-PAM)1, where the optical irradiation is focused to the diffraction limit to achieve cellular1 or even subcellular2 level lateral resolution. As a valuable complement to existing optical microscopy technologies, OR-PAM brings in at least two novelties. First and most importantly, OR-PAM detects optical absorption contrasts with extraordinary sensitivity (i.e., 100%). Combining OR-PAM with fluorescence microscopy3 or with optical-scattering-based OCT4 (or with both) provides comprehensive optical properties of biological tissues. Second, OR-PAM encodes optical absorption into acoustic waves, in contrast to the pure optical processes in fluorescence microscopy and OCT, and provides background-free detection. The acoustic detection in OR-PAM mitigates the impacts of optical scattering on signal degradation and naturally eliminates possible interferences (i.e., crosstalks) between excitation and detection, which is a common problem in fluorescence microscopy due to the overlap between the excitation and fluorescence spectra. 
Unique for optical absorption imaging, OR-PAM has demonstrated broad biomedical applications since its invention, including, but not limited to, neurology5, 6, ophthalmology7, 8, vascular biology9, and dermatology10. In this video, we teach the system configuration and alignment of OR-PAM as well as the experimental procedures for in vivo functional microvascular imaging.

Optical-resolution photoacoustic microscopy (OR-PAM) is an emerging technology capable of imaging optical absorption contrasts in vivo with cellular resolution and sensitivity. Here, we provide a visualized instruction on the experimental protocols of OR-PAM, including system configuration, system alignment, typical in vivo experimental procedures, and functional imaging schemes.

三次元光学分解能光音響顕微鏡

Optical microscopy, providing valuable insights at the cellular and organelle levels, has been widely recognized as an enabling biomedical technology. As ...

生物工学

Integrated Photoacoustic Ophthalmoscopy and Spectral-domain Optical Coherence Tomography

Both the clinical diagnosis and fundamental investigation of major ocular diseases greatly benefit from various non-invasive ophthalmic imaging technologies. Existing retinal imaging modalities, such as fundus photography1, confocal scanning laser ophthalmoscopy (cSLO)2, and optical coherence tomography (OCT)3, have significant contributions in monitoring disease onsets and progressions, and developing new therapeutic strategies. However, they predominantly rely on the back-reflected photons from the retina. As a consequence, the optical absorption properties of the retina, which are usually strongly associated with retinal pathophysiology status, are inaccessible by the traditional imaging technologies.
Photoacoustic ophthalmoscopy (PAOM) is an emerging retinal imaging modality that permits the detection of the optical absorption contrasts in the eye with a high sensitivity4-7 . In PAOM nanosecond laser pulses are delivered through the pupil and scanned across the posterior eye to induce photoacoustic (PA) signals, which are detected by an unfocused ultrasonic transducer attached to the eyelid. Because of the strong optical absorption of hemoglobin and melanin, PAOM is capable of non-invasively imaging the retinal and choroidal vasculatures, and the retinal pigment epithelium (RPE) melanin at high contrasts 6,7. More importantly, based on the well-developed spectroscopic photoacoustic imaging5,8 , PAOM has the potential to map the hemoglobin oxygen saturation in retinal vessels, which can be critical in studying the physiology and pathology of several blinding diseases 9 such as diabetic retinopathy and neovascular age-related macular degeneration.
Moreover, being the only existing optical-absorption-based ophthalmic imaging modality, PAOM can be integrated with well-established clinical ophthalmic imaging techniques to achieve more comprehensive anatomic and functional evaluations of the eye based on multiple optical contrasts6,10 . In this work, we integrate PAOM and spectral-domain OCT (SD-OCT) for simultaneously in vivo retinal imaging of rat, where both optical absorption and scattering properties of the retina are revealed. The system configuration, system alignment and imaging acquisition are presented.

Photoacoustic ophthalmology (PAOM), an optical-absorption-based imaging modality, provides the complementary evaluation of the retina to the currently available ophthalmic imaging technologies. We report the using of PAOM integrated with spectral-domain optical coherence tomography (SD-OCT) for simultaneous multimodal retinal imaging in rats.

統合された光音響眼底検査とスペクトラルドメイン光コヒーレンストモグラフィー

Both the clinical diagnosis and fundamental investigation of major ocular diseases greatly benefit from various non-invasive ophthalmic imaging ...

Universal Hand-held Three-dimensional Optoacoustic Imaging Probe for Deep Tissue Human Angiography and Functional Preclinical Studies in Real Time

The exclusive combination of high optical contrast and excellent spatial resolution makes optoacoustics (photoacoustics) ideal for simultaneously attaining anatomical, functional and molecular contrast in deep optically opaque tissues. While enormous potential has been recently demonstrated in the application of optoacoustics for small animal research, vast efforts have also been undertaken in translating this imaging technology into clinical practice. We present here a newly developed optoacoustic tomography approach capable of delivering high resolution and spectrally enriched volumetric images of tissue morphology and function in real time. A detailed description of the experimental protocol for operating with the imaging system in both hand-held and stationary modes is provided and showcased for different potential scenarios involving functional and molecular studies in murine models and humans. The possibility for real time visualization in three dimensions along with the versatile handheld design of the imaging probe make the newly developed approach unique among the pantheon of imaging modalities used in today&#8217;s preclinical research and clinical practice.

We provide herein a detailed description of the experimental protocol for imaging with a newly developed hand-held optoacoustic (photoacoustic) system for three-dimensional functional and molecular imaging in real time. The demonstrated powerful performance and versatility may define new application areas of the optoacoustic technology in preclinical research and clinical practice.

ディープティシュ人間血管造影および機能前臨床研究のためのユニバーサルハンドヘルド三次元光音響イメージングプローブリアルタイムで

The exclusive combination of high optical contrast and excellent spatial resolution makes optoacoustics (photoacoustics) ideal for simultaneously ...

Novel Photoacoustic Microscopy and Optical Coherence Tomography Dual-modality Chorioretinal Imaging in Living Rabbit Eyes

Photoacoustic ocular imaging is an emerging ophthalmic imaging technology that can noninvasively visualize ocular tissue by converting light energy into sound waves and is currently under intensive investigation. However, most reported work to date is focused on the imaging of the posterior segment of the eyes of small animals, such as rats and mice, which poses challenges for clinical human translation due to small eyeball sizes. This manuscript describes a novel photoacoustic microscopy (PAM) and optical coherence tomography (OCT) dual-modality system for posterior segment imaging of the eyes of larger animals, such as rabbits. The system configuration, system alignment, animal preparation, and dual-modality experimental protocols for in vivo, noninvasive, label-free chorioretinal imaging in rabbits are detailed. The effectiveness of the method is demonstrated through representative experimental results, including retinal and choroidal vasculature obtained by the PAM and OCT. This manuscript provides a practical guide to reproducing the imaging results in rabbits and advancing photoacoustic ocular imaging in larger animals.

This manuscript describes the novel setup and operating procedure of a photoacoustic microscopy and optical coherence tomography dual-modality system for noninvasive, label-free chorioretinal imaging of larger animals, such as rabbits.

生活家兎眼に新規光音響顕微鏡、光コヒーレンストモグラフィーのデュアル モダリティ網脈絡膜イメージング

Photoacoustic ocular imaging is an emerging ophthalmic imaging technology that can noninvasively visualize ocular tissue by converting light energy into ...

工学

Non-invasive Parenchymal, Vascular and Metabolic High-frequency Ultrasound and Photoacoustic Rat Deep Brain Imaging

Photoacoustics and high frequency ultrasound stands out as powerful tools for neurobiological applications enabling high-resolution imaging on the central nervous system of small animals. However, transdermal and transcranial neuroimaging is frequently affected by low sensitivity, image aberrations and loss of space resolution, requiring scalp or even skull removal before imaging. To overcome this challenge, a new protocol is presented to gain significant insights in brain hemodynamics by photoacoustic and high-frequency ultrasounds imaging with the animal skin and skull intact. The procedure relies on the passage of ultrasound (US) waves and laser directly through the fissures that are naturally present on the animal cranium. By juxtaposing the imaging transducer device exactly in correspondence to these selected areas where the skull has a reduced thickness or is totally absent, one can acquire high quality deep images and explore internal brain regions that are usually difficult to anatomically or functionally describe without an invasive approach. By applying this experimental procedure, significant data can be collected in both sonic and optoacoustic modalities, enabling to image the parenchymal and the vascular anatomy far below the head surface. Deep brain features such as parenchymal convolutions and fissures separating the lobes were clearly visible. Moreover, the configuration of large and small blood vessels was imaged at several millimeters of depth, and precise information were collected about blood fluxes, vascular stream velocities and the hemoglobin chemical state. This repertoire of data could be crucial in several research contests, ranging from brain vascular disease studies to experimental techniques involving the systemic administration of exogenous chemicals or other objects endowed with imaging contrast enhancement properties. In conclusion, thanks to the presented protocol, the US and PA techniques become an attractive noninvasive performance-competitive means for cortical and internal brain imaging, retaining a significant potential in many neurologic fields.

The present work describes a new protocol to perform non-invasive high-frequency ultrasound and photoacoustic based imaging on rat brain, to efficiently visualize deep subcortical regions and their vascular patterns by directing signals on skull foramina naturally present on animal cranium.

非侵襲的実質細胞、血管および代謝高周波超音波および光音響ラット脳深部イメージング

Photoacoustics and high frequency ultrasound stands out as powerful tools for neurobiological applications enabling high-resolution imaging on the central ...

神経科学

A High-performance Compact Photoacoustic Tomography System for In Vivo Small-animal Brain Imaging

In vivo small-animal imaging has an important role to play in preclinical studies. Photoacoustic tomography (PAT) is an emerging hybrid imaging modality that shows great potential for both preclinical and clinical applications. Conventional optical parametric oscillator-based PAT (OPO-PAT) systems are bulky and expensive and cannot provide high-speed imaging. Recently, pulsed-laser diodes (PLDs) have been successfully demonstrated as an alternative excitation source for PAT. Pulsed-laser diode PAT (PLD-PAT) has been successfully demonstrated for high-speed imaging on photoacoustic phantoms and biological tissues. This work provides a visualized experimental protocol for in vivo brain imaging using PLD-PAT. The protocol includes the compact PLD-PAT system configuration and its description, animal preparation for brain imaging, and a typical experimental procedure for 2D cross-sectional rat brain imaging. The PLD-PAT system is compact and cost-effective and can provide high-speed, high-quality imaging. Brain images collected in vivo at various scan speeds are presented.

A High-performance Compact Photoacoustic Tomography System for In Vivo Small-animal Brain Imaging

A compact pulsed-laser diode-based photoacoustic tomography (PLD-PAT) system for high-speed in vivo brain imaging in small animals is demonstrated.

高性能小型光音響トモグラフィーシステム<em&gt;インビボ</em&gt;小動物脳イメージング

In vivo small-animal imaging has an important role to play in preclinical studies. Photoacoustic tomography (PAT) is an emerging hybrid imaging modality ...

Hand-held Clinical Photoacoustic Imaging System for Real-time Non-invasive Small Animal Imaging

Translation of photoacoustic imaging into the clinic is a major challenge. Handheld real-time clinical photoacoustic imaging systems are very rare. Here, we report a combined photoacoustic and clinical ultrasound imaging system by integrating an ultrasound probe with light delivery for small animal imaging. We demonstrate this by showing sentinel lymph node imaging in small animals along with minimally invasive real-time needle guidance. A clinical ultrasound platform with access to raw channel data allows the integration of photoacoustic imaging leading to a handheld real-time clinical photoacoustic imaging system. Methylene blue was used for sentinel lymph node imaging at 675 nm wavelength. Additionally, needle guidance with dual modal ultrasound and photoacoustic imaging was shown using the imaging system. Depth imaging of up to 1.5 cm was demonstrated with a 10 Hz laser at a photoacoustic imaging frame rate of 5 frames per second.

A clinical handheld photoacoustic imaging system will be demonstrated for real-time non-invasive small animal imaging.

手持ちの臨床音響小動物の非侵襲的な実時間イメージングによる画像計測

Translation of photoacoustic imaging into the clinic is a major challenge. Handheld real-time clinical photoacoustic imaging systems are very rare. Here, ...

Pulsed Laser Diode-Based Desktop Photoacoustic Tomography for Monitoring Wash-In and Wash-Out of Dye in Rat Cortical Vasculature

Photoacoustic (PA) tomography (PAT) imaging is an emerging biomedical imaging modality useful in various preclinical and clinical applications. Custom-made circular ring array-based transducers and conventional bulky Nd:YAG/OPO lasers inhibit translation of the PAT system to clinics. Ultra-compact pulsed laser diodes (PLDs) are currently being used as an alternative source of near-infrared excitation for PA imaging. High-speed dynamic in vivo imaging has been demonstrated using a compact PLD-based desktop PAT system (PLD-PAT). A visualized experimental protocol using the desktop PLD-PAT system is provided in this work for dynamic in vivo brain imaging. The protocol describes the desktop PLD-PAT system configuration, preparation of animal for brain vascular imaging, and procedure for dynamic visualization of indocyanine green (ICG) dye uptake and clearance process in rat cortical vasculature.&#160;

A compact pulsed laser diode-based desktop photoacoustic tomography (PLD-PAT) system is demonstrated for high-speed dynamic in vivo imaging of small animal cortical vasculature.

ラット皮質脈管構造での洗浄・インおよび染料の洗浄を監視するためのパルスレーザーダイオードベースのデスクトップ光音響断層撮影

Photoacoustic (PA) tomography (PAT) imaging is an emerging biomedical imaging modality useful in various preclinical and clinical applications. ...

Dual Raster-Scanning Photoacoustic Small-Animal Imager for Vascular Visualization

Imaging of vascular networks on small animals has played an important role in basic biomedical research. Photoacoustic imaging technology has great potential for application in the imageology of small animals. The wide-field photoacoustic imaging of small animals can provide images with high spatiotemporal resolution, deep penetration, and multiple contrasts. Also, the real-time photoacoustic imaging system is desirable to observe the hemodynamic activities of small-animal vasculature, which can be used to research the dynamic monitoring of small-animal physiological features. Here, a dual-raster-scanning photoacoustic imager is presented, featuring a switchable double-mode imaging function. The wide-field imaging is driven by a two-dimensional motorized translation stage, while the real-time imaging is realized with galvanometers. By setting different parameters and imaging modes, in vivo visualization of small-animal vascular network can be performed. The real-time imaging can be used to observe pulse change and blood flow change of drug-induced, etc. The wide-field imaging can be used to track the growth change of tumor vasculature. These are easy to be adopted in various areas of basic biomedicine research.

A dual raster-scanning photoacoustic imager was designed, which integrated wide-field imaging and real-time imaging.

血管可視化のための二重ラスター走査光音響小動物イメージャー

Imaging of vascular networks on small animals has played an important role in basic biomedical research. Photoacoustic imaging technology has great ...

Multispectral Optoacoustic Tomography for Functional Imaging in Vascular Research

Microcirculatory impairment has been recognized in various disease processes, underlying this growing theme within vascular research. In recent years, the development of live imaging systems has set the (analytical) pace in both basic and clinical research, with the objective of creating new instruments capable of providing real-time, quantifiable endpoints with clinical interest and application. Near-infrared spectroscopy (NIRS), positron emission tomography (PET), computed tomography (CT), and magnetic resonance imaging (MRI) are available, among other techniques, but cost, image resolution, and reduced contrast are recognized as common challenges. Optoacoustic tomography (OT) offers a new perspective on vascular functional imaging, combining state-of-the-art optical absorption and spatial resolution capacities (from micrometer optical to millimeter acoustic resolution) with tissue depth. In this study, we tested the applicability of multispectral optoacoustic tomography (MSOT) for functional imaging. The system uses a tunable optical parametric oscillator (OPO) pumped by an Nd: YAG laser, providing excitation pulses sensed by a 3D probe at wavelengths from 680 nm to 980 nm. Images obtained from the human forearm were reconstructed through a specific algorithm (supplied within the manufacturer&#39;s software) based on the response of specific chromophores. Maximal Oxygenated Hemoglobin (Max HbO2) and Deoxygenated Hemoglobin (Max Hb), Total Hemoglobin (HbT), and mean Oxygen Saturation (mSO2) to vascular density (&#181;Vu), inter-unit average distances (&#950;Ad), and capillary blood volume (mm3) may be measured using this system. The applicability potential found with this OT system is relevant. Ongoing software developments will surely improve the utility of this imaging system.

The present protocol describes the acquisition of multispectral optoacoustic images of in vivo human skin vasculature. These include the quantification of hemoglobin and melanin, regarded as chromophores of interest for functional analysis.

血管研究における機能イメージングのためのマルチスペクトル光音響断層撮影

Microcirculatory impairment has been recognized in various disease processes, underlying this growing theme within vascular research. In recent years, the ...

切り替え可能な音響光学分解能光音響顕微鏡

要約

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この動画の章

三次元光学分解能光音響顕微鏡

統合された光音響眼底検査とスペクトラルドメイン光コヒーレンストモグラフィー

ディープティシュ人間血管造影および機能前臨床研究のためのユニバーサルハンドヘルド三次元光音響イメージングプローブリアルタイムで

生活家兎眼に新規光音響顕微鏡、光コヒーレンストモグラフィーのデュアルモダリティ網脈絡膜イメージング

非侵襲的実質細胞、血管および代謝高周波超音波および光音響ラット脳深部イメージング

高性能小型光音響トモグラフィーシステム

手持ちの臨床音響小動物の非侵襲的な実時間イメージングによる画像計測

ラット皮質脈管構造での洗浄・インおよび染料の洗浄を監視するためのパルスレーザーダイオードベースのデスクトップ光音響断層撮影

血管可視化のための二重ラスター走査光音響小動物イメージャー

血管研究における機能イメージングのためのマルチスペクトル光音響断層撮影

切り替え可能な音響光学分解能光音響顕微鏡

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三次元光学分解能光音響顕微鏡

統合された光音響眼底検査とスペクトラルドメイン光コヒーレンストモグラフィー

ディープティシュ人間血管造影および機能前臨床研究のためのユニバーサルハンドヘルド三次元光音響イメージングプローブリアルタイムで

生活家兎眼に新規光音響顕微鏡、光コヒーレンストモグラフィーのデュアル モダリティ網脈絡膜イメージング

非侵襲的実質細胞、血管および代謝高周波超音波および光音響ラット脳深部イメージング

高性能小型光音響トモグラフィーシステム

手持ちの臨床音響小動物の非侵襲的な実時間イメージングによる画像計測

ラット皮質脈管構造での洗浄・インおよび染料の洗浄を監視するためのパルスレーザーダイオードベースのデスクトップ光音響断層撮影

血管可視化のための二重ラスター走査光音響小動物イメージャー

血管研究における機能イメージングのためのマルチスペクトル光音響断層撮影

生活家兎眼に新規光音響顕微鏡、光コヒーレンストモグラフィーのデュアルモダリティ網脈絡膜イメージング