헤드스페이스 가스 크로마토그래피-탠덤 사중극자 질량분석법에 의한 동물 유래 의학의 트리메틸아민 검출을 위한 개선된 기술

요약

여기에서는 동물 유래 의약품에서 트리메틸아민(TMA) 측정에 적합한 헤드스페이스 가스 크로마토그래피-탠덤 사중극자 질량분석법(HS-GC-MS/MS) 방법을 설명합니다. 이 프로토콜에는 샘플 전처리, 헤드스페이스 처리, 분석 조건, 방법론적 검증 및 동물 유래 의약품의 TMA 측정이 포함됩니다.

초록

동물 유래 의약품은 특유의 특성과 상당한 치료 효과를 가지고 있지만 대부분 명백한 비린내이가 있어 임상 환자의 순응도가 낮습니다. 트리메틸아민(TMA)은 동물 유래 의약품의 주요 비린내 성분 중 하나입니다. 잿물 첨가 후 급격한 산-염기 반응으로 인한 헤드스페이스 바이알의 압력 증가로 인해 TMA가 헤드스페이스 바이알에서 빠져나가 동물유래 의약품의 비린내에 대한 연구 진행이 지연되어 기존 검출 방법으로는 TMA를 정확하게 식별하기 어렵습니다. 본 연구에서는 산과 잿물 사이의 격리층으로 파라핀층을 도입한 제어된 검출 방법을 제안하였다. TMA 생산 속도는 자동 온도 조절 용광로 가열을 통해 파라핀 층을 천천히 액화시킴으로써 효과적으로 제어 할 수 있습니다. 이 방법은 우수한 재현성과 높은 감도로 만족스러운 선형성, 정밀 실험 및 회수율을 보여주었습니다. 동물 유래 의약품의 탈취에 대한 기술 지원을 제공했습니다.

서문

동물 부위 및/또는 그 부산물에서 추출한 제품(여기서는 동물 유래 의약품이라고 함)을 활용하여 인간의 질병을 치료하는 것이 점점 더 주목받고 있습니다. 암, 심혈관 질환, 간경변, 유방염 및 기타 질병을 치료하는 데 중요한 역할을 하며 강력한 효과, 소량, 중요하고 구체적인 임상 효능의 장점이 있습니다. 그러나 동물성 의약품은 일반적으로 비린내가 두드러져 환자의 순응도에 큰 영향을 미치며 특히 어린이 ^1,2에게 불리합니다. 비린내는 주로 약에 함유된 단백질, 아미노산, 지방 및 기타 물질에서 비롯되며, 지방산 산화, 아미노산 분해 및 기타 비린내를 가진 다양한 물질을 생성하는 기타 방법을 통해 분해됩니다 ^2,3,4. 그 중 트리메틸아민(TMA)은 썩거나 썩은 동물 유래 식품에 널리 존재하는 비린내를 동반한 휘발성 가스이다⁵.

지금까지, 가스 크로마토그래피 (GC), 액체 크로마토 그래피 (LC), 이온 크로마토 그래피, 분광 광도법....

프로토콜

Pheretima, Periplaneta americana 및 Hirudo의 의약 재료에 대한 정보는 표 1을 참조하십시오. 그들은 청두 중국 전통 의학 대학의 Xu Runchun 교수에 의해 Pheretima aspergillum (E.Perrier), Periplaneta americana L. 및 Whitmania pigra Whitman의 건조 된 시체로 확인되었습니다.

1. 검체 추출

1. Pheretima, Periplaneta americana 및 Hirudo를 허브 분쇄기(재료 표 참조)로 부수고 약용 분말을 2번(체 구멍: 0.8mm) 및 4번(체 구멍: 0.25mm) 표준 약물 체를 통해 체로 치고 두 체 사이에 분말을 수집하여 필요한 샘플 분말을 얻습니다.
   알림: Pheretima 는 분쇄 후 푹신하므로 분말을 체질할 필요가 없습니다.
2. 50mL 플라스틱 원심분리기 튜브에 분말 1g(정확 0.001g)을 넣고 5% 트리클로로아세트산(TCA) ....

토론

동물 유래 의약품은 전신, 장기 또는 조직, 생리학적 또는 병리학적 산물, 배설물 또는 분비물, 동물의 가공 제품에서 유래합니다. TMA는 동물성 의약품에서 비린내를 유발하는 중요한 원인입니다. 후각 역치가 매우 낮고(0.000032 × ^10-6 V/V) 강한 비린내를 풍기는 전형적인 악취 물질이다¹³. 현재 일반적으로 사용되는 HS-GC-MS 방법은 동물 유래 의약품에서 TMA를 안정적이고 정?.......

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
Centrifuge	Beckman Coulter Trading (China) Co.	SSC-2-0213
Chinese herbal medicine grinder	Zhejiang Yongkang Xi'an Hardware and Pharmaceutical Factory	HX-200K
Convection oven	Sanyo Electric Co., Ltd	MOV-112F
Decapper for 20 mm Aluminum caps	ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc	V1750004
Electronic balance	Shimadzu Corporation Japan	AUW220D
Gas chromatography mass spectrometry	Shimadzu Corporation Japan	TQ-8050 NX
Headspace Vial	ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc	25760200
Homogenizer	Shanghai biaomo Factory	FJ200-SH
Preassembled Cap	ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc	L4150050
Sample sieve	Zhenxing Sieve Factory	/
SH-Volatile Amine	Chengdu Meimelte Technology Co., Ltd	227-3626-01
Sodium hydroxide	Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd	2022101401
Solid paraffin wax	Shanghai Hualing Kangfu apparatus factory	20221112
Trichloroacetic acid	Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd	2022102001
Trimethylamine hydrochloride	Chengdu Aifa Biotechnology Co., Ltd	AF22022108
Ultra-pure water system	Sichuan Youpu Ultrapure Technology Co., Ltd	UPR-11-5T