쥐의 종아리 봉합사-뼈 복합 결함의 확립: 봉합사-재생 치료 조사를 위한 표준화된 모델

요약

우리는 쥐의 종아리 봉합사-뼈 복합 결손의 자세한 수술 절차를 설명하고 모델의 단기 및 장기 예후에 대한 조사를 설명합니다. 우리는 봉합사 재생 요법을 개발하기 위한 표준화된 모델을 구축하는 것을 목표로 합니다.

초록

대규모 종골 결손은 종종 두개골 봉합 파괴와 일치하여 종골 결손 복원 및 두개골 발달에 장애를 초래합니다(후자는 발달 중인 두개골에서 발생). 그러나 표준화된 모델의 부재는 봉합사 재생 요법에 대한 연구의 진전을 방해하고 개별 연구에서 비교 분석을 수행하는 데 어려움을 초래합니다. 이 문제를 해결하기 위해 현재 프로토콜은 쥐의 종아리 봉합사-뼈 복합 결함에 대한 자세한 모델링 프로세스를 설명합니다.

이 모델은 관상 봉합사를 가로질러 4.5mm × 2mm 크기의 전체 두께의 직사각형 구멍을 뚫어 생성되었습니다. 쥐는 안락사시켰고, 두개골 샘플은 수술 후 0일째, 2주차, 6주차, 12주차에 채취했다. 수술 직후 채취한 샘플의 μCT 결과, 관상 봉합사와 인접한 뼈 조직의 제거를 포함하는 봉합사-뼈 복합 결손이 성공적으로 확립되었음을 확인했습니다.

수술^{후 6주와} 12주의 데이터는 결손이 봉합되는 자연 치유 경향을 보여주었습니다. 조직학적 염색은 결손 중심에서 증가된 미네랄화된 섬유와 새로운 뼈를 보여줌으로써 이러한 경향을 더욱 입증했습니다. 이러한 결과는 종골 결손 후 시간이 지남에 따라 점진적인 봉합 유합술을 나타내며 봉합사 재생을 위한 치료적 개입의 중요성을 강조합니다. 우리는 이 프로토콜이 봉합사 재생 요법의 개발을 촉진하여 종골 결손의 기능적 복원에 대한 새로운 통찰력을 제공하고 봉합사 손실과 관련된 부작용을 줄일 것으로 기대합니다.

서문

두개골 봉합사는 두개골 사이의 조밀한 섬유질 연결로, 관절 역할을 하여 약간의 두개골 움직임을 용이하게 하고 압력을 받는 뇌에 보호 쿠션을 제공한다¹. 최근 몇 년 동안 두개골 발달, 두개안면 항상성 및 내재된 골수호전위(osteo-reparative potential)에서 두개골 봉합사의 중추적인 역할이 강조된 연구가 증가하고^있습니다 2,3,4,5,6,7,8. 성장과 발달 기간 동안, 두개골 봉합사는 두개골의 주요 성장 센터 역할을 한다⁴. 새로운 뼈 형성은 봉합사 양쪽의 골형성 전방에서 발생하는 반면, 봉합사 내의 세포는 미분화 중간엽 상태를 유지하여 뇌 성장과 함께 균형 잡힌 두개골 확장을 보장합니다^....

프로토콜

이 연구의 모든 동물 시술은 쓰촨대학교 중국서부구강학 학교 윤리위원회(WCHSIRB-D-2021-597)에서 검토 및 승인했습니다. 총 12마리(4개의 시점 각각에 3마리의 랫드)의 Sprague-Dawley(SD) 랫트(수컷, 300g, 8주령)를 상업적 출처에서 얻었습니다( 재료 표 참조).

1. 수술 전 준비

1. 수술 용품
   1. 곡선형 겸자, 일회용 멸균 메스, 골막 엘리베이터, 관개 바늘, 면봉, 저속 핸드피스, 수술용 모터, 치과용 저속 원형 버(그림 1B, 각각 직경 1.2mm 및 0.8mm), 바늘 홀더, 3-0 모노필라멘트 봉합사 및 직선 가위를 포함하여 그림 1A에 표시된 수술 기구를 준비합니다.
2. 살균 및 소독
   1. 사전에 증기 멸균(125-135 °C, 20-25분)으로 기기를 멸균하십시오.
   2. 에탄올을 사용하여 전기 면도기와 같이 열에 민감한 의료 장비를 살균하십시오.
   3. 멸균 의료용 부직포를 사용하....

토론

기존의 종래의 종골 결손 모델은 두개골 봉합사를 포함하든 그렇지 않든 주로 경조직의 복구에 집중하며, 봉합사 중간엽의 생명 재생을 무시하는 경우가 많다^19,20. 봉합사 재생 연구에서, Mardas et ^al.15,16과 같은 이전 모델은 트레핀 버를 사용하여 쥐의 시상 봉합사 전체에 5mm 원형 결?.......

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
4% paraformaldehyde	Biosharp	BL539A
2% Iodophor solution	Chengdu Jinshan Chemical Reagent Co., Ltd.	None
75% Ethanol	Chengdu Jinshan Chemical Reagent Co., Ltd.	None
Cotton balls	Haishi Hainuo Group Co., Ltd.	None
Cotton swabs	Lakong Medical Devices Co.,	None
Curved forceps	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	None
Dataviewer and Ctan software for residual defect volume assessments	Bruker	None
Dental low-speed round burs	Dreybird Medical Equipment Co., Ltd.	RA3-012 RA1-008
Disposable sterile scalpel	Hangzhou Huawei Medical Supplies Co., Ltd.	None
Disposable syringes (22 G)	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	SB1-089(IX)
Electric shaver	JASE	BM320210
Ethylene Diamine Tetraacetic Acid (EDTA)	BioFroxx	1340GR500
Hematoxylin and Eosin Stain Kit	Biosharp	BL700B
Irrigation needle (23 G)	Sichuan New Century Medical Polymer Products Co., Ltd.	None
Low-speed handpiece	Guangzhou Dental Guard Technology Co., Ltd.	None
Masson’s Trichrome Stain Kit	Solarbio	G1340
Medical non-woven fabrics	Henan Yadu Industrial Co., Ltd.	None
Micro-computed tomography (µCT)	Scanco Medical AG	µCT45
Mimics 20.0 for cross-sectional images	Materialise	None
Needle holders	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	None
Periosteal elevator	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	None
Saline solution	Sichuan Kelun Pharmaceutical Co., Ltd.	None
Scanco medical visualizer software for 3D image reconstruction	Scanco Medical AG	None
SPSS Statistics 20.0 for statistical analysis	IBM	None
Sprague-Dawley rats	Byrness Weil Biotech Ltd	None
Straight Scissors	Chengdu Shifeng Co., Ltd.	None
Surgical Motor	MARATHON	N3-140232
Surgical sutures (3-0 monofilament)	Hangzhou Huawei Medical Supplies Co., Ltd.	None