PBST를 제거하고 파라포름알데히드 고정 초파리 유충 사체를 실온에서 40분 동안 차단제에 담그십시오. 차단제를 0.2% PBST로 희석한 200마이크로리터의 1차 항체로 교체합니다. 유충을 섭씨 4도에서 밤새 부화하도록 둡니다.
다음날 0.2% PBST로 유충을 10분 동안 씻습니다. 그런 다음 튜브에서 PBST를 제거하고 희석된 2차 항체 200마이크로리터를 추가합니다. 어두운 곳에서 상온에서 1.5시간 동안 배양합니다.
TO-PRO R 3 요오드화물과 같은 핵 염료를 배양 튜브에 30분 동안 주입하면서 어둠 속에서 미세소관을 염색합니다. 마지막으로 2차 항체와 핵 염료를 0.2% PBST로 10분 동안 헹굽니다.