미세투석 섬유를 팔뚝에 넣은 후 일회용 주사기를 미세주입 펌프의 주사기 홀더 트레이에 넣습니다. 충혈 단계에서는 젖산 링거, 식염수 또는 차량 용액을 관류합니다. 국부 가열 장치를 피부에 부착하고 프로브 접착 디스크를 사용하여 반투과성 멤브레인을 덮도록 합니다.
레이저 도플러 유량 측정 프로브를 국소 히터 중앙의 개구부에 삽입하고 데이터 수집 소프트웨어에서 시작을 클릭하여 적혈구 또는 RBC 플럭스 값을 기록하기 시작합니다. 기구를 착용하지 않은 피험자의 팔에 자동 혈압 커프를 놓습니다. 국부 히터를 섭씨 33도로 설정하여 열 중성 피부 온도를 유지하십시오.
데이터 수집 소프트웨어의 연속 기록에 주석을 추가하려면 화면 오른쪽 상단에 있는 텍스트 상자를 클릭하십시오. 댓글을 입력하고, 댓글을 받을 채널을 선택한 다음, 추가를 클릭합니다. RBC 플럭스가 섭씨 33도에서 안정화되면 기준선 데이터 수집을 시작합니다.
기준선 데이터 수집 후 5분에서 10분 후에 기준선 혈압을 측정하고 기록합니다. 데이터 수집 소프트웨어에서 코멘트, end baseline을 입력합니다. 마이크로 주입 펌프를 끄고 젖산 링거 용액 주사기를 가장 낮은 농도의 아세틸콜린이 포함된 주사기로 교체합니다.
새 주사기를 고정하고 프로브를 통해 유체 관류를 확인한 후 미세주입 펌프를 다시 켭니다. 데이터 수집 소프트웨어 기록에서 주석으로 start minus 10을 입력합니다. 관류의 마지막 순간에 혈압을 측정하고 기록하십시오.
주어진 농도에 대한 관류가 끝나면 주사기를 다음으로 높은 농도로 교체하십시오. 최종 관류 후 국부 히터 온도를 섭씨 43도까지 올립니다. RBC 플럭스가 안정화되도록 하고 링거 용액을 니트로프러스사이드 나트륨으로 교체합니다.
이 최대 혈관 확장 단계에서 약 3분마다 혈압을 측정하고 기록합니다. 최대 적혈구 플럭스 정체기가 발생하면 데이터 수집 소프트웨어의 오른쪽 하단에서 중지를 선택합니다. 앞에서 설명한 대로 기준 데이터 수집을 기록합니다.
프로토콜의 요구 사항에 따라 로컬 히터를 섭씨 39도 또는 42도로 높입니다. 국부적인 열 적용에 반응하여 RBC 플럭스 정체기 후, 미세 투석 프로브를 통해 L-Name을 관류합니다. 그런 다음 국소 히터를 섭씨 43도로 설정합니다.
그런 다음 섭씨 43도에서 RBC 플럭스 고원 후 니트로프러스사이드 나트륨으로 미세 투석 프로브 풍부를 시작하여 플럭스가 최대 고원에 도달하도록 합니다. 각 투여량에 대한 풍부함이 시작되면, 적혈구 플럭스가 피크까지 지속적으로 증가하는 것이 관찰되었고, 그 후 열과 SNP에 의한 정체기가 관찰되었습니다. 나트륨 nitroprusside의 풍부는 적혈구 플럭스의 상승으로 묘사 된 최대 국소 혈관 확장을 일으켰습니다.
상대적으로 낮은 RBC 플럭스는 산화질소 합성효소 억제제의 존재 하에서 관찰되었다. 최대 국소 혈관 확장 동안, 이전의 산화질소 합성효소 억제로 인해 RBC 플럭스가 기하급수적으로 증가합니다. 국소 가열 프로토콜에서 L-Name은 RBC 플럭스에서 안정적인 안정기를 달성한 후 관류되었습니다.
L-Name에 대한 반응으로 새로운 고원에 도달할 때까지 RBC 플럭스에서 급격한 감소가 관찰되었습니다. 가열은 RBC 플럭스에서 추가적인 피크 및 천저 반응을 생성했습니다.