시작하려면 제모 크림을 사용하여 마취된 쥐의 흉부 부위에서 머리카락을 제거하고 마우스를 생리학적 모니터링 플랫폼에 등을 아래로 향하게 놓습니다. 생리학적 모니터링 테이블의 구리 시트에 소량의 전도성 젤을 바릅니다. 이 젤에 마우스 일시 정지를 고정하여 심전도 및 호흡 데이터를 쉽게 캡처할 수 있습니다.
최적의 이미지 품질을 보장하기 위해 소량의 초음파 투과 젤을 바르십시오. 프로브와 플랫폼 사이의 작은 각도로 플랫폼을 측면으로 정렬하고 심장의 흉골 장축 시야를 얻습니다. 그런 다음 B 모드에서 적합한 심장 부분을 찾습니다.
터치 스크린에서 Color Doppler를 활성화하고 프로브를 약간 움직여 올바른 위치를 찾습니다. 이제 해당 버튼을 눌러 Pulse Wave 모드로 전환합니다. 관상 동맥의 노란색 지시선을 흐름 방향과 평행하게 배치하고 Save Clip 버튼을 눌러 기준선 데이터를 문서화합니다.
이소플루란 농도를 3%로 높이고 30초 동안 기다립니다. 시간이 지남에 따라 유속이 점차 증가하는지 확인하십시오. Save Clip 버튼을 다시 자주 눌러 혈류를 가장 빠른 속도로 캡처합니다.
심장 초음파 촬영을 완료한 후 플랫폼에서 동물을 조심스럽게 제거합니다. 피크 속도 기능 도구를 사용하여 피크 이완기 속도를 측정하고 획득한 이미지를 사용하여 심장의 수축기 기능을 평가합니다. 최대 유량에서의 이완기 최대 관상동맥 유속을 기준선에서의 이완기 피크 관상동맥 유속으로 나누어 CFR을 계산합니다.
심장을 노출시키기 위해 네 번째 늑간 공간에 개흉술을 시행합니다. 그런 다음 5-0 실크 봉합사를 사용하여 LAD 동맥을 결찰합니다. 허혈성 심근의 다운스트림 변색을 시각화하는 시각적 확인을 통해 마우스의 허혈을 확인합니다.
30분 동안 LAD 동맥 폐색술을 시행합니다. 그런 다음 합자를 풀고 1-2분 동안 변색된 심장 근육 부위가 붉어지는 것을 모니터링하여 재관류를 확인합니다. 관상 동맥 폐색 및 재관류 후 가슴을 여러 겹으로 닫고 쥐가 약 30분 동안 회복되도록 합니다.
이전에 입증된 대로 재관류 후 1, 3, 5, 8, 24 및 48시간에 CFR을 다시 측정합니다. 허혈 재관류 수술 전에 CFR 기준선을 측정하고 마우스의 CFR 값이 정상이었습니다. 그러나 수술 후 재관류 1시간 후 CFR이 눈에 띄게 감소했습니다.
재관류 시간이 길어짐에 따라 CFR 값은 지속적으로 낮게 유지되었으며, 이는 저관류가 최소 2일 동안 지속될 수 있음을 시사합니다. 마우스에서 CFR이 유의하게 감소했을 때 좌심실 심장 기능에서 유의미한 변화는 관찰되지 않았습니다.