시작하려면 나비 바늘과 튜브에 1% 칼륨 EDTA 용액을 코팅합니다. 혈액을 한 방울 정도 모으기 위해 바늘 바로 뒤에 있는 튜브를 자릅니다. 안면 마스크를 통해 마취를 유지하면서 마취된 쥐를 입체 프레임에 놓습니다.
동물 아래에 온열 패드를 놓고 꼬리의 일부가 패드와 직접 접촉하도록 합니다. 동물이 옆을 향하도록 뒤로 움직이면 측면 꼬리 정맥이 상단에 보입니다. 꼬리를 따뜻한 물에 담가 측면 정맥을 확장합니다.
그런 다음 70 % 에탄올로 꼬리를 닦습니다. 일반 백열 전구를 사용하여 꼬리에 따뜻한 빛을 비추십시오. 21G 나비 바늘을 20도 각도에서 5mm 깊이로 측면 꼬리 정맥에 삽입합니다.
다음으로, 항응고제로 5mg의 칼륨 EDTA가 들어 있는 500마이크로리터 진공 수집 튜브에 혈액을 수집합니다. 바늘을 제거하고 천자 부위에 압력을 가하여 혈액의 흐름을 멈춥니다. 쥐를 집 우리로 돌려보냅니다.
그런 다음 튜브를 부드럽게 10회 뒤집어 혈액 내 항응고제를 혼합합니다. 얼음에 1.5cm 깊이의 구멍을 뚫고 튜브를 수직으로 놓습니다. 채취 후 1시간 이내에 냉장 원심분리기에서 혈액 샘플을 원심분리하여 혈장을 분리합니다.
그런 다음 적혈구층과 백혈구층을 피하면서 약 200마이크로리터의 혈장을 흡인합니다. 회수된 혈장을 0.2밀리리터 멸균 마이크로튜브에 넣습니다. 품질 관리를 위해 5마이크로리터의 샘플을 따로 보관하고 나머지 샘플은 분석할 때까지 섭씨 영하 80도에서 보관합니다.
52일째에는 진공 기법, 55일째에는 꼬리 착유, 58일에서 64일째에는 방울 기법과 같은 다양한 방법을 사용하여 5개의 시점에서 쥐로부터 혈액을 채취했습니다. UV 분광광도계를 사용하여 평가한 플라즈마 샘플의 품질은 진공 기술을 사용할 때 플라즈마가 0.647의 평균 흡광도 값으로 분홍색을 띠는 것으로 나타났습니다. 유사하게, 꼬리 착유 기술은 평균 흡광도가 0.620인 분홍색 플라즈마를 생성했습니다.
대조적으로, 중력 활성화 낙하 인출 시스템을 사용하면 평균 플라즈마 흡광도 값이 크게 감소된 투명한 플라즈마 샘플을 얻을 수 있으며, 이는 이 절차가 분석을 위한 고품질 샘플을 얻는 데 최적임을 시사합니다.
