먼저, 구강이 칸디다 성장에 음성인 쥐를 9개의 그룹으로 무작위로 분포시키며, 각 그룹은 빛이 있든 없든 커큐미노이드의 농도가 다르도록 합니다. 첫째 날에는 면역억제제인 프레드니솔론을 그룹의 모든 구성원에게 피하 주사합니다. 테트라사이클린 염산염을 밀리리터당 0.83밀리그램의 농도로 식수에 첫날부터 실험이 끝날 때까지 제공합니다.
둘째 날에는 클로르프로마진 클로라이드를 각 허벅지 근육에 근육 주사하여 마우스를 진정시켜 구강 내 접종합니다. 다음으로, 멸균 면봉을 갓 준비된 칸디다 알비칸스의 표준화된 현탁액에 담그십시오. 쥐를 누운 자세를 취한 후 적신 면봉으로 혀를 30초 동안 문지릅니다.
5일째 되는 날에는 면역 억제를 유지하기 위해 프레드니솔론을 무료 피하 주사합니다. 7일째 되는 날, 치료 전에 마취된 쥐를 실이 장착된 PAD 장치의 누운 자세에 놓습니다. 입을 벌리기 위해 앞니에 실을 감습니다.
70 마이크로 리터의 광감작제를 C + L + 그룹에 속하는 각 쥐의 혀 등쪽에 분배합니다. 그런 다음 혀를 다시 구강 안으로 옮기고 방사선 조사 전 기간으로 마우스를 어두운 환경에 20분 동안 보관합니다. 광감작 기간이 지나면 LED 장치를 혀의 등쪽에 놓고 7분 동안 조명을 비춥니다.
설명과 같이 C+L군에 감광제를 바르고 쥐를 27분 동안 어두운 곳에 두십시오. 치료 직후 멸균 면봉을 사용하여 혀에서 칸디다 알비칸스를 회수하기 위해 1분 동안 혀의 등쪽을 면봉으로 닦습니다. 각 샘플 면봉을 1mL의 멸균 식염수와 와류가 들어 있는 튜브에 1분 동안 넣어 미생물 세포를 재현탁시킵니다.
지체 없이 PBS에서 10배 연속 희석을 수행하고 Sabouraud Dextrose 한천 플레이트에 25마이크로리터 분취액을 복제하여 플레이트합니다. 플레이트를 섭씨 37도에서 48시간 동안 호기성으로 배양합니다. 48시간 후 디지털 콜로니 카운터를 사용하여 효모 콜로니 수를 확인합니다.
각 동물에 대한 칸디다 알비칸스의 하중을 계산하십시오. 8일째 되는 날, 동물을 적절하게 안락사시킨 후 외과적으로 혀를 제거하고 혀 전체를 제거하기 위해 유두를 돌기 전에 혀를 제거합니다. 마지막으로 분리된 혀의 조직병리학적 분석을 진행합니다.
구강 칸디다증의 쥐 모델은 감염된 쥐의 혀에 전형적인 흰색 반점과 유사 막을 보여주었습니다. 항균 광역학 요법은 80 마이크로몰 커큐미노이드 농도에서 칸디다 알비칸스 생존력을 감소시켰습니다. 감염되지 않은 동물의 혀는 온전한 판막, 기저막, 선모 유두를 포함한 정상적인 건강한 조직을 보였다.
C-L-그룹에서, 효모와 필라멘트는 각질화된 상피층에서 관찰되었다. 경미한 염증 반응이 기저 결합 조직에 존재했습니다. 대조적으로, 80 마이크로몰 커큐미노이드에 의해 매개된 항균 광역학 요법으로 치료된 마우스는 혀 상피의 각질화된 층에서 더 적은 수의 곰팡이 세포를 가지고 있었습니다.
