시작하려면 마취된 쥐를 이미징 시스템에서 누운 상태로 주둥이를 코콘에 묶습니다. 아래쪽 다리를 펴고 무릎이 공중에서 약간 향하도록 마우스를 배치합니다. 이미징 시스템 컴퓨터에서 호환되는 소프트웨어를 엽니다.
수집 제어판에서 초기화를 클릭하여 시스템을 예열하고 온도 표시등이 녹색으로 바뀔 때까지 기다립니다. 그런 다음 이미징 마법사를 클릭합니다. 필터 쌍을 클릭한 후 설정이 epi-illumination에 대해 구성되어 있는지 확인합니다.
그런 다음 다음을 누릅니다. 풀다운 목록에서 관심 프로브를 찾아 올바른 여기 및 방출 설정을 선택하고 다음을 클릭합니다. 피사체를 이미징하기 위해 마우스를 선택하십시오.
노출 매개변수에서 자동 설정이 선택되어 있고 형광 및 사진 옵션이 선택되어 있는지 확인합니다. 시야각의 체크리스트에서 D에서 22.6cm까지 선택하고 다음을 누릅니다. 모든 설정이 올바른지 확인한 후 시퀀스 획득 버튼을 누르고 이미지의 노출이 적절한지 확인합니다.
이미지를 분석하려면 흑백 이미지의 각 무릎 관절 위에 일정한 크기의 관심 영역 원을 배치합니다. 각 무릎 관절에 대한 총 복사 효율과 평균 복사 효율을 계산합니다. 복사 효율이 반대쪽 다리에서도 계산되는 경우 손상된 다리에 대한 복사 효율 측정값을 반대쪽 다리의 복사 효율 측정값으로 나누어 데이터를 정규화합니다.
형광 반사 이미징은 손상되지 않은 마우스에 비해 마우스의 손상된 관절에서 훨씬 더 큰 프로테아제 활성을 보여주었습니다. 손상된 관절은 반대쪽 관절에 비해 평균 복사 효율이 43% 더 높았고, 다치지 않은 쥐의 관절은 그렇지 않은 쥐의 관절에 비해 평균 복사 효율이 더 높았습니다. 부상 후 2주 동안 반대쪽 관절에 비해 손상된 관절에서 30-80% 더 큰 복사 효율이 관찰되었습니다.
대조적으로, 수술로 수술된 관절은 반대쪽 관절에 비해 4주차에 300% 더 높은 복사 효율을 보였으며, 이는 수술의 현저한 교란 효과를 시사합니다.