Multiplex Cyclic Fluorescent Immunohistochemical Staining of Cancer Tissue Section(암 조직 절편의 다중 순환 형광 면역조직화학적 염색)

시작하려면 암 조직 절편이 포함된 미리 준비된 슬라이드를 구하십시오. 1차 항체의 작동 혼합물을 준비합니다. 항체 복합체를 슬라이드 섹션에 추가하고 실온에서 1시간 동안 배양합니다.

그런 다음 0.1% 트윈 PBS로 5분 동안 슬라이드를 세 번 세척합니다. 형광 2차 항체 혼합물을 준비합니다. 슬라이드에 방울 방향으로 넣고 실온에서 1시간 동안 배양합니다.

그런 다음 실온에서 1시간 동안 2차 1차 항체 배양을 수행합니다. 슬라이드를 0.1% 트윈 PBS로 각각 5분씩 3회 세척합니다. 그리고 여과지를 사용하여 조직 주변에서 과도한 물을 제거합니다.

마찬가지로, 앞서 설명한 대로 2차 항체 배양 및 세척의 두 번째 라운드를 수행합니다. 이제 과망간산 칼륨 시약을 조직에 첨가하십시오. 1분 후 흐르는 물로 5분간 헹군다.

알코올 농도를 높여 탈수를 수행하십시오. 마지막으로 DAPI를 추가하여 조직 섹션을 완전히 덮고 다중 스펙트럼 이미징을 위한 커버 슬립을 배치합니다. 다중 면역형광 영상은 폐암 뇌 전이 조직에서 CD 3 양성, CD 8 양성, CD 20 양성 세포의 존재를 나타냈습니다.