시작하려면 안락사된 쥐를 수술 플랫폼에 놓고 흉강을 엽니다. 수술용 가위를 사용하여 흉곽 아래를 가로로 절개하고 쥐의 양쪽에서 쇄골까지 갈비뼈를 자릅니다. 그런 다음 횡격막을 절단하여 흉벽을 해제하고 집게로 갈비뼈를 들어 올려 흉강을 노출시킵니다.
집게로 흉선을 잡고 흉선을 제자리에 고정하는 결합 조직을 부드럽게 자릅니다. 쥐 흉선 조직의 효소 해리를 수행하려면 세척한 흉선을 15밀리리터 튜브 캡에 넣고 멸균 수술용 가위를 사용하여 조직을 미세하게 다집니다. 튜브에 2ml의 쥐 해리 칵테일을 추가합니다.
흉선 조각이 들어있는 캡을 부착하고 튜브를 5 번 뒤집어 조직을 다시 매달아 놓습니다. 튜브 캡을 파라핀 필름으로 감쌉니다. 배양 후 튜브를 랙에 넣고 조직이 가라앉을 때까지 기다립니다.
상층액을 제거하고 70마이크로미터 세포 여과기를 통해 50밀리리터의 얼음 차가운 튜브에 통과시킵니다. 그런 다음 20 % FBS 매체와 함께 99 밀리리터의 M2 2를 세포 현탁액에 첨가하십시오. 튜브를 500G에서 섭씨 4도에서 5분 동안 원심분리합니다.
상층액을 버린 후 펠릿을 M1 99 및 2%FBS 배지에 다시 현탁시킵니다.
