시작하려면 절단된 200마이크로리터 피펫 팁의 하단을 사전 제작된 미세유체 트래핑 장치에 삽입합니다. 0.2마이크로미터 필터가 장착된 주사기를 사용하여 피펫을 사용하여 400마이크로리터의 베타 카제인 용액을 칩의 입구 저장소에 주입합니다. 900G에서 6분 동안 칩을 원심분리합니다.
이제 액체 레벨은 입구와 출구 모두에서 동일해야 합니다. 두 개의 대물렌즈 슬라이드에 스페이서의 윤곽을 그립니다. 고산소 플라즈마로 슬라이드를 1분 동안 청소하여 친수성으로 만듭니다.
아가로스로 완전히 덮일 때까지 슬라이드 위에 낮은 겔화 온도의 아가로스를 추가합니다. 그런 다음 슬라이드를 90도 각도로 기울이고 여분의 아가로스를 조직에 배출합니다. 슬라이드를 섭씨 50도에서 30분 동안 놓습니다.
1mm 프로브가 장착 된 휴대용 프로브 초음파 발생기를 사용하여 준비된 프로테오올리포좀을 초음파 처리합니다. 초음파 처리를 5 번 반복하기 전에 proteo SUV를 30 초 동안 얼음 위에 두십시오. 100 마이크로리터 주사기를 사용하여 프로테오 SUV의 0.5 마이크로리터 방울을 준비된 아가로스 겔에 증착합니다.
약 10분 동안 질소 흐름을 사용하여 물방울을 건조시킵니다. 주사기와 바늘을 사용하여 측면의 작은 구멍을 통해 팽윤 용액을 준비된 챔버로 피펫팅하고 소포가 섭씨 22도에서 최소 30분 동안 부풀어 오르도록 합니다. 챔버를 단단한 표면에 두드려 겔에서 GUV를 채취합니다.
현미경 검사를 위해 GUV를 포획하려면 현미경에 부동태화 미세유체 칩을 장착합니다. 결함을 확인한 후 구부러진 바늘로 튜브를 저장소 배출구에 연결하십시오. 다른 쪽 끝을 1밀리리터 주사기에 연결한 후 주사기를 분당 최대 유속이 10마이크로리터인 펌프에 장착합니다.
저장소의 세척 버퍼를 새 매체로 교체하십시오. 최소 80 마이크로리터의 완충액 P로 세척하십시오.여분의 완충액을 제거한 후 프로테오 GUV를 저장소에 추가합니다. 충분한 GUV가 칩에 갇힐 때까지 시간이 지남에 따라 칩을 모니터링합니다.
여분의 GUV 용액을 피펫팅합니다. 그런 다음 분당 0.1 내지 1 마이크로리터의 유속으로 세척 완충액 P를 첨가한다. 마지막으로, 충분한 양의 소포로 트랩의 위치를 파악합니다.
현미경에 설정을 적용한 후 분당 0.5마이크로리터의 유속으로 저장소에 버퍼 R을 추가합니다. 낮은 겔링 온도의 아가로스 겔에서 건조된 프로테오 LUV를 재수화하면 마이크로미터 크기의 소포가 형성되었습니다. GUV를 채취하여 베타 카제인 부동태화 미세유체 장치에 가두었습니다.
