먼저 발치한 치아를 멸균 식염수로 헹구어 피를 제거합니다. 멸균 식염수로 관개하는 동안 카바이드 열구 버를 사용하여 치아를 세로로 두 조각으로 조심스럽게 자릅니다. 그 후, 치아와 온전한 치수를 얼음에 담아 멸균 알파-MEM 배지에 담아 세포 및 조직 배양 실험실로 운반합니다.
그런 다음 추출한 치아 샘플을 멸균 배양 페트리 접시에 넣고 멸균 PBS로 3-4회 철저히 헹굽니다. 날카로운 굴삭기와 집게를 사용하여 캐비티 펄프 조직을 조심스럽게 제거하고 멸균 PBS로 철저히 청소하여 혈흔을 제거합니다. 이제 각 부분에 1-2 밀리리터의 멸균 PBS를 넣어 접시 표면을 네 부분으로 나눕니다.
치수조직 샘플을 한 곳에 놓고 수술용 칼날을 사용하여 작은 조각으로 자릅니다. PBS를 사용하여 조직 조각을 연속적인 영역으로 들어 올려 옮깁니다. 한편, 10 % FBS와 항생제 칵테일을 함유 한 비필수 아미노산을 함유 한 알파 -MEM을 약 0.8-1 밀리리터의 6 웰 플레이트에 추가하십시오.
그리고 미디어를 균일하게 퍼뜨리기 위해 움직입니다. 치과용 치수줄기세포의 1차 배양 발달의 다양한 단계를 보여줍니다. 치아 조직에서 둥근 기포형 세포가 파종 둘째 날에 관찰되었습니다.
조직에서 나오는 엉망진창인 세포 네트워크가 4일째 되는 날에 관찰되었다. 그러나 13일째가 되자 배엽에서 나온 세포의 수가 증가했습니다. 그리고 두 번째 주가 끝날 무렵, 대부분의 외식물은 방추체 모양의 형태를 가진 많은 부착 세포로 둘러싸였습니다.
