유세포 분석으로 Side Population Cells를 검출하기 위해 Hoechst를 사용한 마우스 뼈 골수 세포 염색

시작하려면 마우스에서 골수 세포를 얻고 2밀리리터의 세포 현탁액에 밀리리터당 5마이크로그램의 Hoechst 33342를 추가합니다. 네거티브 컨트롤 튜브도 준비합니다. 섭씨 37도의 수조에서 30분마다 부드럽게 교반하면서 90분 동안 배양합니다 배양 후 세포를 얼음으로 5분 동안 식힌 다음 섭씨 4도에서 5분 동안 250G에서 원심분리합니다.

2% FBS가 함유된 Hank's Balanced Salt Solution이 포함된 콜드 러닝 용액에 세포를 재현탁시킵니다. 다시 섭씨 4도에서 5분 동안 원심분리합니다. 다음으로, 생성된 세포 펠릿을 샘플당 500마이크로리터의 실행 용액에 재현탁시킵니다.

유세포 분석 전에 세포에 요오드화 프로피듐 요오드화물 밀리리터당 2마이크로그램을 보충하고 약 5분 동안 얼음 위에 올려 놓습니다.