Bakteryjne wykrywanie próbek ludzkiej plwociny z dolnych dróg oddechowych za pomocą chipa mikroprzepływowego

Na początek delikatnie wstrząśnij rozmrożonym odczynnikiem do amplifikacji izotermicznej. Odwirować odczynnik, aby zebrać go w całości na dnie probówki. Odpipetować 20 mikrolitrów odczynnika do amplifikacji izotermicznej do przygotowanej probówki wirówkowej o pojemności 200 mikrolitrów.

Przykryj probówkę pokrywką i przenieś ją do obszaru przygotowania próbki. Teraz dodaj 34,5 mikrolitra docelowej próbki kwasu nukleinowego do każdej probówki. Wstrząśnij delikatnie, aby dokładnie wymieszać.

Odwirować probówki na krótko, aby zebrać wszystkie próbki z dna probówek. Następnie napisz numer próbki na etykiecie opakowania chipa, otwórz chip mikroprzepływowy etykietą opakowania skierowaną do góry. Umieść chip tak, aby porty wlotowe i wylotowe były skierowane do góry.

Następnie za pomocą pipety pobierz 50 mikrolitrów przygotowanego układu reakcji amplifikacji i dodaj go do głównego kanału chipa przez port wlotowy. Przestań dodawać, gdy kanał główny zostanie wypełniony. Wytrzyj nadmiar płynu wokół portów wlotowych i wylotowych niestrzępiącą się chusteczką.

Następnie kliknij przycisk otwierania zasobnika na analizatorze kwasów nukleinowych po jego wstępnym podgrzaniu. Umieść wiór przednią stroną do góry na tacy, upewniając się, że mały cylinder ustalający wyłania się ze środkowej szczeliny wióra, aby go zabezpieczyć. Naciśnij przycisk zamykania tacy, aby włożyć chip do analizatora kwasów nukleinowych.

Wprowadź informacje o testowaniu próbki w obszarze informacji o próbce w interfejsie wykrywania. Następnie naciśnij przycisk rozpoczęcia wykrywania, aby rozpocząć wykrywanie próbki. W próbce pierwszej stwierdzono zakażenie Klebsiella pneumoniae, podczas gdy próbki druga i siódma wykazały infekcje wielodrobnoustrojowe.

Wskaźnik dodatni był reprezentowany przez krzywą amplifikacji w kształcie litery S, podczas gdy linia pozioma reprezentowała wskaźnik ujemny.