Reconstrução Vascular com a Técnica do Manguito no Transplante Hepático Ortotópico de Camundongo

Resumo

Este protocolo fornece informações técnicas para a reconstrução de vasos usando a técnica do manguito no transplante hepático ortotópico de camundongos.

Resumo

O transplante hepático ortotópico de camundongos é uma metodologia eficaz para investigar os mecanismos subjacentes da isquemia hepática e lesão de reperfusão. No entanto, os desafios técnicos representam uma barreira para a utilização desse valioso modelo experimental e a transmissão dessas habilidades para a próxima geração. O aspecto mais desafiador desse procedimento é a reconstrução vascular, incluindo a veia porta (VP), a veia cava inferior infra-hepática (IHIVC) e a veia cava inferior supra-hepática. O uso de manguitos de plástico, em vez de suturas, permite uma reconstrução mais suave da VP e da IHIVC. Os vasos são reconstruídos anexando um manguito feito de um cateter intravenoso à ponta do vaso do enxerto e interpondo o manguito no vaso receptor. Os dois aspectos mais cruciais são visualizar adequadamente o lúmen interno do vaso e evitar o uso de força excessiva. Nosso objetivo é fornecer uma visão geral técnica das reconstruções vasculares usando a técnica do manguito na cirurgia do receptor. Espera-se que essas dicas técnicas para a técnica do manguito ajudem os microcirurgiões a facilitar a reconstrução vascular e avançar em suas pesquisas.

Introdução

O transplante hepático ortotópico de camundongo (MOLT) é um método experimental eficaz relatado pela primeira vez em 1991¹. Este modelo experimental, que utiliza camundongos geneticamente modificados e vários reagentes de pesquisa, desempenhou um papel fundamental na investigação de lesões de isquemia e reperfusão quentes e frias. No entanto, a alta complexidade técnica do modelo tem dificultado o desenvolvimento da medicina básica para transplante hepático². O MOLT envolve três etapas principais: (1) recuperação do fígado do camundongo doador, (2) cirurgia na mesa dorsal e (3) implantação do fígado no receptor. Dentre e....

Protocolo

O protocolo experimental foi aprovado pelo Comitê de Experimentação Animal da Universidade de Kyoto. O estudo utilizou camundongos C57BL/6, com idade superior a 10 semanas e peso entre 25 g e 30 g, obtidos de uma fonte comercial (ver Tabela de Materiais). Todos os animais foram anestesiados com isoflurano a 2,5% (seguindo protocolos aprovados institucionalmente), mantidos em condições específicas livres de patógenos, e todos os procedimentos experimentais foram conduzidos em conformidade com o Regulamento de Experimentação Animal da Universidade de Kyoto. Os instrumentos apropriados utilizados para o estudo estão listados na Tabela de Materiai....

Discussão

Aprender a reconstrução vascular é o aspecto mais desafiador para alcançar o MOLT bem-sucedido. A qualidade do manguito influencia significativamente na dificuldade de reconstrução, dado o pequeno tamanho dos camundongos⁵. Este artigo fornece um protocolo detalhado para preparação, fixação e reconstrução do manguito.

Embora não haja grandes diferenças em relação aos relatos anteriores em relação à preparação e conexão do man.......

Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
16 G intravenous catheter	TERUMO	SR-FF2032	IHIVC cuff
20 G intravenous catheter	TERUMO	SR-FF1651	PV cuff
8-0 braid silk	Natsume Seisakusho	CR9-80B2	8-0 silk
Belzer UW Cold Storage Solution	Astellas		Organ preservation fluid
Bulldog clamp	B BRAUN	FB329R	Bulldog clamp
C57BL/6 mice	Oriental Bio Service
Isoflurane inhalation solution	Viatris		Anesthesic
Micro Blunted Tips 0.1 mm x 0.06 mm	F.S.T	11253-20	Straight microforceps
Micro Serrefine Clamp Applicator with Lock	F.S.T	18056-14	Vessel clip applicator
Micro Serrefines	F.S.T	18055-4	Vessel clip
No.11 Spare Blades	FEATHER Safety Razor	11	Blades
Ophthalmic scissor, round handle	B BRAUN	FD103R	Microscissor
Plastic rectangular-shaped container	Daiso		10 cm long, 15 cm wide and 6 cm high
SuperGrip Tips	F.S.T	00649-11	Curved microforceps
SZX7	Olympus	SZX7	Microscope