Lesão por Constrição Crônica do Nervo Infraorbital Distal (DIoN-CCI) em Camundongos para Estudo da Dor Neuropática do Trigêmeo

Resumo

A lesão por constrição crônica do nervo infraorbital distal em camundongos induz mudanças no comportamento espontâneo (aumento da atividade de limpeza facial) e no comportamento nocifensivo em resposta à estimulação tátil (hiperresponsividade à estimulação capilar de von Frey) que são sinais de dor contínua e alodinia e serve como modelo para a dor neuropática do trigêmeo.

Resumo

Os modelos animais continuam sendo ferramentas necessárias para estudar a dor neuropática. Este manuscrito descreve o modelo de lesão por constrição crônica do nervo infraorbital distal (DIoN-CCI) para estudar a dor neuropática do trigêmeo em camundongos. Isso inclui os procedimentos cirúrgicos para realizar a lesão de constrição crônica e os testes comportamentais pós-operatórios para avaliar as mudanças no comportamento espontâneo e evocado que são sinais de dor contínua e alodinia mecânica. Os métodos e leituras comportamentais são semelhantes ao modelo de lesão por constrição crônica do nervo infraorbital (IoN-CCI) em ratos. No entanto, mudanças importantes são necessárias para a adaptação do modelo IoN-CCI a camundongos. Primeiro, a abordagem intraorbital é substituída por uma abordagem mais rostral com uma incisão entre o olho e a almofada do bigode. O IoN é, portanto, ligado distalmente fora da cavidade orbital. Em segundo lugar, devido à maior atividade locomotora em camundongos, permitir que os ratos se movam livremente em pequenas gaiolas é substituído pela colocação de camundongos em dispositivos de retenção projetados e construídos sob medida. Após a ligadura DIoN, os camundongos exibem mudanças no comportamento espontâneo e em resposta à estimulação capilar de von Frey que são semelhantes às dos ratos IoN-CCI, ou seja, aumento da limpeza facial direcionada e hiperresponsividade à estimulação capilar de von Frey do território IoN.

Introdução

A dor neuropática surge de danos ao sistema nervoso somatossensorial, levando à transmissão anormal de sinais sensoriais ao cérebro. O dano do nervo somatossensorial nem sempre leva à dor neuropática, mas a prevalência aumenta com a gravidade da neuropatia clínica ^1,2. Pacientes com dor neuropática apresentam sintomas específicos, como sensações espontâneas (queimação, formigamentos, sensações elétricas) e dor anormalmente intensa ou prolongada a estímulos inócuos ou nocivos que tendem a se tornar crônicos e resistentes ao tratamento com analgésicos convencionais

Protocolo

Os animais são tratados e cuidados de acordo com as diretrizes para pesquisa da dor em animais conscientes da Associação Internacional para o Estudo da DOR e de acordo com os regulamentos flamengos e europeus para pesquisa animal e as diretrizes ARRIVE. O protocolo é aprovado pelo Comitê de Ética institucional.

1. Animais

1. Use camundongos C57BL / 6J machos e fêmeas (Janvier, 10 semanas de idade na chegada).
2. Alojar camundongos machos e fêmeas separadamente em gaiolas de camundongos padrão de fundo sólido em uma sala de colônia com umidade de 40% a 60% e temperatura ambient....

Discussão

Em ratos, foi argumentado anteriormente que uma abordagem intra-orbital para a IoN é preferível, considerando a importância da musculatura fina intacta controlando padrões complexos de batida na discriminação vibristátil e a distância relativa da incisão da linha média ao território do nervo cutâneo^{infraorbital 10}. Outros argumentaram que uma abordagem distal por meio de uma incisão na pele pilosa caudal ao coxim vibrissal tem uma série de benefício.......

Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
Chromic catgut (6-0)	Dynek	CG602D	ligatures
Cotton applicator	Pharmacy
Digital video camera	Sony	HDR-CX330E
Dumont #5 forceps	Fine Science Tools	11251-10
Dumont forceps - Micro-blunted tips (#5/45)	Fine Science Tools	11253-25
Duratears	Alcon	0037-820	ophthalmic ointment
Hooked ligation aid	Fine Science Tools	18062-12
Ketalar	Pfizer		ketamine (50 mg/mL)
Operation microscope	Kaps	SOM 62
Precision cotton swab	Qosina	10225
Precision trimmer	Philips	HP6392/00
Rompun	Bayer		xylazine (2%)
Scissors - blunt tips	Fine Science Tools	14574-09
Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit	Stoelting	58011
Vicryl Rapide	Ethicon	MPVR489H	sutures