Uma técnica modificada para induzir a síndrome dos ovários policísticos em camundongos

Resumo

Este protocolo introduz uma técnica para induzir modelos de síndrome dos ovários policísticos (SOP) em camundongos por meio da liberação controlada de letrozol usando mini-bombas. Sob anestesia adequada, a minibomba foi implantada por via subcutânea e a SOP foi induzida com sucesso nos camundongos após um certo período de liberação da minibomba.

Resumo

A síndrome dos ovários policísticos (SOP) é uma das principais causas de infertilidade em mulheres. Modelos animais são amplamente utilizados para estudar os mecanismos etiológicos da SOP e para o desenvolvimento de medicamentos relacionados. Modelos de camundongos induzidos por letrozol replicam os fenótipos metabólicos e reprodutivos de pacientes com SOP. O método tradicional de tratamento com letrozol em camundongos com SOP requer dosagem diária durante um determinado período, o que pode ser trabalhoso e causar estresse significativo aos camundongos. Este estudo descreve um método simples e eficaz para induzir SOP em camundongos, implantando uma minibomba de liberação controlada de letrozol. Uma mini-bomba capaz de liberar estável e contínua uma quantidade quantitativa de letrozol foi fabricada e implantada por via subcutânea em camundongos sob anestesia. Este estudo demonstrou que o modelo de camundongo imitou com sucesso as características da SOP após o implante da minibomba de letrozol. Os materiais e equipamentos usados neste estudo estão prontamente disponíveis para a maioria dos laboratórios, não exigindo personalização especial. Coletivamente, este artigo fornece um método único e fácil de executar para induzir SOP em camundongos.

Introdução

A síndrome dos ovários policísticos (SOP) é uma das condições mais comuns entre as mulheres em idade reprodutiva¹. Afeta até 18% das mulheres em todo o mundo e é a principal causa de infertilidade feminina em todo o mundo ^2,3. A SOP é caracterizada por uma série de anormalidades reprodutivas inter-relacionadas, incluindo secreção perturbada de gonadotrofinas, anovulação crônica, aumento da produção de andrógenos e morfologia ovariana policística⁴. Além dos distúrbios ginecológicos, a SOP também aumenta o risco de doenças cardiova....

Protocolo

Todos os protocolos experimentais em animais neste estudo foram aprovados pelo Comitê de Ética Animal da Universidade de Fudan. Camundongos C57BL/6J fêmeas, com 4 semanas de idade, foram usados aqui. Os detalhes dos animais, reagentes e equipamentos usados neste estudo estão listados na Tabela de Materiais.

1. Preparação da mini-bomba

1. Pegue o pó de letrozol (50 mg) armazenado no frasco da embalagem original, centrifugue o pó de letrozol no frasco a 300 x g por 5 s (à temperatura ambiente) e abra a tampa.
2. Adicione lentamente 625 μL de DMSO ao pó ....

Discussão

Este relatório demonstra um protocolo simples para induzir SOP em camundongos usando materiais de fácil acesso. O modelo de SOP em camundongos é essencial para explorar os mecanismos da SOP e rastrear drogas²⁶. Dos métodos disponíveis para induzir modelos de SOP em camundongos, a indução de letrozol é um dos mais comumente usados. O uso de letrozol pode desenvolver e manter um quadro hiperandrogênico inibindo a conversão de testosterona em estradiol ou a.......

Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
Syringe	Bofeng Biotech	BD300841	1ML (sterile)
Centrifugation tube	Biological Hope	1850-K	15ML (sterile)
Pipette	Eppendorf	3123000268-A	100μL-1000μL (sterile)
Pipette	TopPette	7010101008	10μL-100μL (sterile)
Letrozole powder	Sigma	L6545-50MG	Primary acting drugs (sterile)
PEG(Poly(ethylene glycol))	Solarbio	P8250	Used for dissolution (sterile)
Sterile Physiological Saline Solution	Biosharp	BL158A	Mini-pump storage
Osmotic Pumps	ALZET	1004	Letrozole storage and sustained release (sterile)
Dimethyl sulfoxide	Biosharp	BS087	Used for dissolution (sterile)
Small Animal Anesthesia Machine	RWD	R500IP	Used for anesthesia
Isoflurane	RWD	20071302	Used for anesthesia
Hemostats	Biosharp	BS-HF-S-125	Surgical instrument
Scissors	Biosharp	BS-SOR-S-100P	Surgical instrument
Needle holder	ShangHaiJZ	J32010	Surgical instrument
Forceps	RWD	F12028	Surgical instrument
Needle and the 4-0 absorbable suture	JINGHUAN	CR413	Surgical instrument
Povidone-iodine swabs	SingleLady	GB26368-2010	Skin disinfection
Depilatory cream	ZIKER BIOTECHNOLOGY	ZK-L2701	Depilation agent for laboratory animals
Nitrile Gloves	Biosharp	BC040-L	Used for aseptic operation
Sterile gauze	ZHENDE	BA69087	Used for wiping liquids
C57BL/6J Mice	Shanghai Model Organisms Center	N/A	Age: 4 weeks
Pet Eye Lubricant	BAITE	SHF021153	Used for mouse eye lubricant
Meloxicam Injection	MEIDAJIA	R21064-21	Used for mouse analgesia (sterile)