Para começar, coloque o filhote de rato anestesiado sobre a mesa na posição ventral. Puxe levemente a parte de trás da cabeça do filhote para visualizar as suturas cranianas do crânio através da pele. Encontre lambda no crânio.
O ventrículo ou local de injeção será visível no meio do caminho entre lambda e o olho. Em ângulo perpendicular, perfurar a pele com ponta de pipeta de vidro, observar-se-á resistência inicial e leve recuo côncavo. Uma vez perfurado, segure a ponta no lugar e pressione o pedal do microinjetor uma vez para injetar um microlitro da mistura de plasmídeos.