Electroporation-Based DNA Plasmids Delivery to Induce In Vivo Mutations in the Mouse

Comece a entrega de plasma de DNA baseado em eletroporação colocando um pedaço quadrado de filme de parafina sobre a mesa e apertando o gel do eletrodo em cima do filme. Em seguida, aplique uma quantidade generosa do gel do eletrodo em cada pá para cobrir completamente as pás do eletrodo. Em seguida, segure o filhote microinjetado com a mistura de DNA plasmidial na mão não dominante, mantendo os dedos atrás da cabeça.

Para posicionar a cabeça do filhote para eletroporação, deslize suavemente um dedo no próximo lado dorsal, posterior à cabeça, e posicione o eletrodo positivo fora da cabeça onde o ventrículo é direcionado. Coloque o eletrodo sobre o olho do filhote e aperte levemente as pás do eletrodo na parte rostral da cabeça do filhote. Pressione o pedal do eletrodo para iniciar a eletroporação.

A cada pulso, gire levemente as pás do eletrodo, no sentido anti-horário, de modo que a pá positiva se mova em direção ao topo da cabeça. Após o último pulso, retire as pás e coloque-as de lado. Os camundongos estavam moribundos cinco meses após a eletroporação, com crescimento tumoral completo detectado através da proteína repórter e análise histológica.