Para iniciar a análise farmacológica de Arabidopsis thaliana F1 bicolor, dissecar e remover os cotilédones de plântulas transgênicas com sete dias de idade. Adicione 500 microlitros de uma solução de Brefeldina A de 30 micromolares ou BFA em um tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitro. Nela mergulhe as mudas dissecadas.
Fixe firmemente uma seringa de 10 mililitros ao tubo da microcentrífuga e aplique um vácuo durante um minuto. Retire a seringa antes de incubar a amostra na solução durante 30 minutos antes da obtenção de imagens. Em seguida, mergulhe a plântula dissecada de sete dias de idade em wortmannin 25 milimolares.
Aplicar o vácuo por um minuto antes de incubar a amostra imersa por 30 minutos. O exame das rotas de tráfico de ERL-1 em plantas transgênicas mostrou que 30 minutos de exposição à solução de Brefeldina A resultaram na detecção de ERL-1-YFP em grandes compartimentos conhecidos como corpos de BFA. Indicou que a Brefeldina A poderia bloquear o tráfico de ERL-1, sugerindo reciclagem ou endocitose de ERL-1.
Quando os transgênicos foram tratados com wortmannin por 30 minutos, estruturas semelhantes a anéis chamadas corpos WM foram destacadas pelo ERL-1-YFP. Mostrou que ERL-1-YFP foram transportados para corpos multivesiculares, indicando que ERL-1 seguiu a rota para vacúolos para degradação.
