Depois de configurar o tambor virtual e a oculografia em vídeo, fixe a cabeça do animal em um palco personalizado. Ajuste a inclinação da cabeça para que os olhos esquerdo e direito sejam nivelados e os cantos nasal e temporal dos olhos estejam alinhados horizontalmente. Transfira o palco com a cabeça fixada do animal para o centro do recinto formado pelos três monitores.
Abra o software de rastreamento ocular e clique em Execução gratuita. Em seguida, clique no botão Executar para ligar a câmera. Ajuste a posição do olho direito até que ele apareça no centro do vídeo.
Gire o braço da câmera para a extremidade extrema esquerda. Em seguida, mova manualmente a posição do olho direito do animal no plano horizontal perpendicular ao eixo óptico com ajuste fino do estágio de translação 2D até que a reflexão X-córnea esteja no centro horizontal da imagem. Agora gire o braço da câmera para a outra extremidade e, se a reflexão da córnea X se afastar do centro da imagem, mova o olho direito ao longo do eixo óptico com o ajuste fino até que a reflexão da córnea X chegue ao centro.
Repita várias vezes até que o reflexo da córnea X permaneça no centro quando o braço da câmera oscilar para a esquerda e para a direita. Clique no botão Calibração e, em seguida, no botão Executar. Ligue o LED de reflexão da córnea em Y e grave sua posição no vídeo.
Em seguida, mude para o LED de reflexão da córnea X e registre sua posição. Para medir o raio de rotação da pupila, gire o braço da câmera para a extremidade esquerda. Grave as posições da pupila e o reflexo da córnea X no vídeo clicando com o botão direito do mouse e, em seguida, gire o braço da câmera para a extremidade direita.
Registre as posições da pupila e o reflexo X-córnea no vídeo. Com base nos valores registrados, calcule o raio de rotação da pupila, Rp, usando esta fórmula. Para desenvolver a relação entre a rotação da pupila e o diâmetro da pupila, ajuste a luminância dos monitores de 0 a 160 candela por metro quadrado para controlar o tamanho da pupila e registre o diâmetro da pupila para cada valor de luminância.
Para cada valor de luminância, meça o raio de rotação da pupila de 8 a 10 vezes e registre o diâmetro da pupila. Em seguida, use a regressão linear para analisar a relação entre o raio de rotação da pupila, Rp e diâmetro da pupila, e para derivar a inclinação e o intercepto do modelo linear.