Para realizar o teste de Von Fray, comece colocando os ratos em um compartimento de vidro temperado transparente sobre um suporte de grade de arame metálico a uma altura de 40 centímetros. Em seguida, medir o limiar de retirada mecânica com fibras eletrônicas de Von Frey. Estimule o pé do rato até que ele reaja visivelmente, como levantando a perna ou evitando-a.
Para avaliar a latência de retirada da pata, ou PWL usando o método Hargreaves, concentre o holofote no centro do pé do rato e pressione o botão de início. Monitore o rato para comportamentos como retração do pé ou lambida da pata e pressione o botão de início novamente para registrar o tempo. Realizar o teste no mesmo membro pélvico três vezes consecutivas.
Após 17 dias de terapia com Tuina, foi observada uma diferença significativa nos limiares de retirada da pata entre os ratos CCD que receberam terapia com Tuina e o grupo CCD não tratado. Os ratos do grupo CCD que receberam terapia com Tuina apresentaram melhora no limiar de dor desde o início do tratamento. Os limiares térmicos de dor diferiram significativamente entre o grupo DCC e o grupo Tuina a partir do 14º dia.