Para realizar a coloração de fosfatase alcalina, comece enxaguando as escamas de Zebrafish colhidas em solução corante de ALP por cinco minutos. Em seguida, coloque as balanças em uma solução de coloração ALP de trabalho por 15 minutos. Em seguida, remova a solução de ALP e lave as escamas em água deionizada para interromper a reação.
Para corar as escamas usando o método de coloração de Von Kossa, comece incubando as escamas em solução de nitrato de prata a 5% por 40 minutos sob luz forte. Em seguida, retire a solução de nitrato de prata e lave as escamas em água deionizada por cinco minutos duas vezes. Incubar as escamas em tiossulfato de sódio a 5% durante cinco minutos e, em seguida, lavá-las novamente com água deionizada.
Monte as escamas no slide usando um meio de montagem. Cubra-os com uma tampa e visualize-os sob um microscópio. Além do método ALP e Von Kossa aqui demonstrado, existem vários outros métodos de coloração que podem ser usados para visualizar vários aspectos da biologia celular ou da matriz nas escalas, como TRAP, fluorescência do cálcio, vermelho de alizarina e coloração imunohistoquímica.
