Comece se preparando para uma craniotomia colocando uma bancada limpa na superfície de trabalho. Tape o cone nasal de um vaporizador de isoflurano na superfície de trabalho. Em seguida, coloque a tubulação de silastic na extremidade de uma agulha de calibre 18, garantindo que um milímetro da ponta da agulha se projete.
Pratique o movimento da agulha marcando uma folha de papel com um ponto de partida para o bregma, outro 0,2 milímetros lateralmente, e faça uma marcação final, um milímetro caudal à segunda marca. Pratique mover a agulha do ponto inicial para a segunda marca, depois a marca final, garantindo que o movimento seja repetível sem guias. Em seguida, raspe a cabeça do animal anestesiado.
Coloque o mouse na superfície de trabalho, mantendo a cabeça no cone do nariz para manter a anestesia e aplique lubrificante ocular em ambos os olhos. Agora, esfregue o local da injeção com gaze estéril mergulhada em solução de iodo. Em seguida, limpe a área com uma compressa compressiva com álcool.
Repetindo esse processo três vezes. Segure firmemente a cabeça com a mão não dominante, colocando o mouse sobre a superfície de trabalho. Arraste a agulha preparada de calibre 18 através da pele da cabeça, ao longo da linha média, em direção rostral e caudal para identificar o bregma.
Agora, mova a agulha dois milímetros lateralmente e um milímetro caudal até o local da injeção. Segurando a agulha verticalmente, empurre-a firmemente através da pele e do osso, até que a tubulação esteja nivelada com a pele. Retraia a agulha, gire e pressione a pele e o osso novamente, repetindo o processo para criar um pequeno orifício no osso.
Usando a agulha romba, verifique se há um orifício suficiente no osso, grande o suficiente para permitir a passagem da agulha. Remova o mouse do cone do nariz. Proceder à limpeza de qualquer sangue do local de injeção com gaze estéril.
Coloque o rato numa gaiola, numa gaiola mais quente, até ficar acordado.