Comece diluindo adequadamente os produtos de anticorpos monoclonais para o enriquecimento da proteína da célula hospedeira. Para diluir medicamentos com concentrações acima de 50 miligramas por mililitro, adicione água deionizada a 15 miligramas do anticorpo monoclonal em um tubo de microcentrífuga de dois mililitros. Para produtos farmacêuticos com concentrações abaixo de 50 miligramas por mililitro, transfira 20 miligramas para um dispositivo de filtro centrífugo de 10 quilodaltons.
Centrifugar o conteúdo a 14.000 G durante 25 minutos à temperatura ambiente para deixar aproximadamente 100 microlitros de solução restantes no tubo. Em seguida, adicione 350 microlitros de tampão de histidina 10 milimolares, com um pH de seis no filtro, após o que vórtice o tubo antes de centrifugar a 14.000 G por 25 minutos à temperatura ambiente. Inverta o filtro e coloque-o no tubo de coleta de amostras.
Centrifugar a amostra a 1000 G durante cinco minutos à temperatura ambiente, recuperando toda a solução no tubo de recolha. Adicione 200 microlitros de tampão de histidina 10 milimolares ao filtro e pipete para cima e para baixo para recuperar a amostra de proteína restante. Transfira toda a solução para o mesmo tubo de coleta.
Vórtice e rotação para baixo como demonstrado anteriormente. Depois de medir a concentração da amostra por nanogota, ajuste-a para 50 miligramas por mililitro adicionando o tampão histidina. Por fim, transfira 300 microlitros da amostra para um tubo de microcentrífuga de dois mililitros.
