Para começar, fixe o capilar de vidro borossilicato aos grampos de borracha almofadados no puxador manual vertical de micropipetas. Ajuste a temperatura térmica do extrator de micropipeta para 950 graus Celsius e realize a pré-tração para obter um capilar de vidro mais fino e macio. Em seguida, ajuste a temperatura do calor para 790 graus Celsius e execute uma tração secundária para produzir micropipetas finais.
Usando um moedor de micropipeta, afie cuidadosamente a abertura da ponta para um diâmetro externo de 11 micrômetros. Em seguida, coloque as micropipetas em uma almofada de fixação de esponja dentro de um frasco de vidro. Incubar os ovos de galinha fertilizados até o estágio de desenvolvimento 18 em uma incubadora de balanço umidificada de 37 graus Celsius.
Limpe bem a área de trabalho com etanol 70%. Após o desenvolvimento, retire os ovos da incubadora. Borrife os ovos com etanol 70% e deixe secar ao ar.
Em seguida, coloque o ovo em um suporte de ovos com a extremidade maior voltada para cima. Usando um par de pinças dentadas afiadas, bata cuidadosamente na extremidade maior da casca do ovo para criar um furo de dois centímetros de diâmetro. Em seguida, remova os fragmentos da casca do ovo.
Coloque o ovo em um estágio de microscópio dissecante e localize o embrião. Em seguida, use a pinça dissecante fina e a tesoura para cortar a membrana amniótica que cobre a parte superior do embrião. Em seguida, coloque uma placa de Petri de 60 milímetros sobre a abertura do ovo.
