Homogeneizar a amostra de coral com um homogeneizador mecânico de dente de serra durante um minuto até que a amostra esteja totalmente homogeneizada e não sejam visíveis aglomerações. Para normalização, coletar uma alíquota de um mililitro do tecido homogeneizado para contagem de células de Symbiodiniaceae, análise do conteúdo de proteína do tecido coral e estimativa de clorofila-A. Se separar o material hospedeiro e as células de algas, centrifugar o homogeneizado de coral restante a 2.500 G por cinco minutos a quatro graus Celsius.
Transfira o sobrenadante que contém o material hospedeiro para um novo tubo de 15 mililitros. Adicione dois mililitros de água fria e ultrapura à pelota de algas e ao vórtice de material hospedeiro e pelota de alga por dois minutos para ressuspender. Centrifugar todas as amostras novamente e transferir o sobrenadante contendo o material hospedeiro para um novo tubo de 15 mililitros.
Depois de descartar o sobrenadante do pellet de algas, retenha o pellet no tubo original de 15 mililitros. Brisa o homogeneizado holobiont ou o hospedeiro separado em frações de Symbiodiniaceae a menos 80 graus Celsius por pelo menos duas horas. Em seguida, liofilize as amostras durante a noite com um vácuo de 0,01 milibar a 85 graus Celsius negativos.
Após a secagem, pesar cada amostra em uma balança de laboratório em tubos de microcentrífuga separados de dois mililitros e sem plastificante. A visualização microscópica não revelou células de Symbiodiniaceae nas amostras de tecido do hospedeiro após três etapas de lavagem. Da mesma forma, mínimo tecido do hospedeiro foi encontrado em frações simbiontes.
No entanto, o homogeneizado holobionto indicou que Symbiodiniaceae intracelulares não foram liberadas de seus simbiossomos através de simples aerografia.
