Para injetar o rato com Dextran, FITC sete dias após a injeção de gel de matriz, ressuspender 0,5 miligramas de Dextran, FITC em 500 microlitros de água bidestilada. Vórtice completamente para obter um micrograma por microlitro de Dextran, solução FITC. Encha uma seringa calibre 29 com 50 microlitros da solução Dextran FITC.
Fixe o rato no instrumento de injeção da veia da cauda, higienize a cauda com uma bola de algodão embebida em álcool a 75% antes de injetar cuidadosamente 50 microlitros da solução Dextran FITC na seringa na veia da cauda. Aplique pressão no local da injeção com o cotonete por um minuto para estancar o sangramento. Devolva o rato à sua gaiola e deixe-o relaxar durante 30 minutos antes de recolher o plugue de gel matricial.
Para coletar o plugue de gel, corte a pele do camundongo eutanasiado ao longo da borda marcada do plugue, usando tesoura cirúrgica. E remova a pele acima do plugue de gel de matriz. Recolha o tampão e enxágue-o num copo com soro fisiológico tamponada com fosfato para lavar o excesso de sangue.
Em seguida, cubra o fundo do de incorporação de tecido com cerca de 0,5 mililitros de gel de incorporação de tecido. Em seguida, coloque rapidamente o plugue de gel de matriz no gel de incorporação de tecido na orientação planejada. Incorpore o plugue com gel de incorporação de tecido adicional.
Solidifique os a 80 graus Celsius negativos durante 12 horas. Depois de remover o bloco de plugue solidificado, corte seções de 12 mícrons de espessura usando um micrótomo de congelamento. Em seguida, monte as seções em lâminas de microscópio.
