Para começar, coloque as lâminas com os cortes endometriais corados imunohistoquimicamente no rack de lâminas de um scanner de imagem patológica panorâmica. Em seguida, coloque o rack no compartimento de digitalização de slides do instrumento para iniciar a digitalização. Quando a digitalização estiver concluída, inicie o software de análise de imagem e crie uma nova pasta.
Importe as imagens que requerem análise. Para construir um classificador de tecido, marque vários tecidos juntamente com uma anotação em branco para estabelecer um classificador que identifique o tecido e as áreas em branco. Use o ajuste em tempo real para observar a capacidade de reconhecimento do software durante a anotação da marca.
Para construir um algoritmo de análise, selecione o algoritmo IHC multiplex padrão no software e escolha os pixels negativos e positivos para definir os parâmetros de cor do reconhecimento celular. Estabeleça os parâmetros do núcleo, citoplasma e membrana celular até que os parâmetros ideais para a imagem sejam encontrados. Agora, defina o limiar de reconhecimento celular positivo e otimize-o até que um limiar apropriado seja obtido.
Em seguida, selecione o classificador de tecido no algoritmo. Verifique a parte do tecido dentro dele para identificar as células com base nos tecidos. Selecione a área de análise e, em seguida, use o algoritmo estabelecido para analisar as imagens.
Uma vez concluída a análise, verifique manualmente a acurácia do reconhecimento tecidual, o reconhecimento negativo e positivo. Se o reconhecimento da imagem estiver impreciso, ajuste os limites do algoritmo e do parâmetro novamente. Execute a análise de imagem até que ela seja bem-sucedida.
Em seguida, exporte os resultados da análise. Definir os diferentes parâmetros de análise de acordo com a expressão de diferentes marcadores imunes endometriais. Use o software para calcular a proporção de células imunes endometriais.
Após o cálculo, use os valores para avaliar os níveis de várias células imunes no endométrio de pacientes com aborto espontâneo recorrente. Diferentes células imunes foram coradas imunohistoquimicamente com base em sua expressão individual de diferentes marcadores. A coloração marrom representa as células imunes positivas e a azul representa o núcleo.
Diferentes células imunes foram expressas em mulheres com abortos espontâneos recorrentes. As células CD56 parecem ser predominantes em 16,76%, com as células CD1a e Foxp3 representando 0,11 a 0,12% da população de células imunes.
