Para começar, use uma pipeta plástica de Pasteur para transferir suavemente as fatias cerebrais coradas fluorescentemente para pratos confocais com fundo de vidro. Recheie estes pratos com ACSF equilibrado. Com uma malha de ferro, prenda as fatias cerebrais do rato no lugar.
Em seguida, coloque as placas confocais de fundo de vidro no palco de um microscópio confocal. Posicione a fatia cerebral aguda na parte inferior do prato e perfunda com ACSF de equilíbrio durante a aquisição de imagens. Usando a objetiva 40X, visualize as células da parede da microvasculatura cortical cerebral.
Em seguida, use um software compatível para capturar pilhas de imagens. Identificar microvasculatura e pericitos cerebrais com base em sua rede e morfologia, em seguida, localizar uma região específica contendo uma rede de microvasculatura cerebral em cada fatia cerebral e capturar imagens. Em condições fisiológicas normais, os pericitos cerebrais não experimentam morte celular.
Pericitos viáveis que não foram corados com iodeto de propídio foram detectados. Os modelos de HAS mostraram pericitos vitais dentro da microvasculatura. Pericitos não vitais também foram detectados.
Os pericitos não vitais marcados com iodeto de propídio permaneceram descolados de toda a microvasculatura.
