Depois de induzir um traumatismo cranioencefálico leve em um rato anestesiado, posicione-o de costas dentro de uma gaiola limpa. Coloque o acolchoamento de espuma sob a viga de equilíbrio para reduzir o risco de lesões nos ratos em caso de quedas durante o teste. Coloque uma caixa de escape em uma das extremidades da viga.
Ative a câmera de vídeo para gravar o teste. Assim que o animal se recuperar, posicione os ratos na outra extremidade da trave de equilíbrio. Posicionar os ratos sobre o feixe de dois centímetros de largura por uma série de cinco tentativas consecutivas.
Registre o início e a conclusão de cada ensaio quando o nariz do rato cruzar as linhas de partida e chegada, respectivamente. Prepare a arena de campo aberto, certificando-se de que está limpa e sem quaisquer sinais de odor prévios. Divida a arena em três zonas distintas: uma zona central interna, uma zona do meio e uma zona externa.
Coloque um rato no centro da arena de campo aberto e inicie o cronômetro. Permita que o rato explore livremente a arena por uma duração de cinco minutos. Após esse período, retorne o rato à gaiola de origem com cuidado e delicadeza.
Quantificar a distância total percorrida pelo rato durante o período de exploração de cinco minutos. Além disso, determine a quantidade de tempo que o rato passa nas três zonas. Certifique-se de que o aparelho de labirinto aquático está em boas condições de funcionamento.
Coloque a plataforma a uma profundidade de 2,5 centímetros abaixo da superfície da água. Tinga a água de preto e posicione as pistas nas quatro direções cardeais. Estabelecer um sistema de monitoramento para registrar e observar o comportamento dos ratos.
Em seguida, introduza o rato no labirinto aquático. Se o rato não conseguir alcançar a plataforma dentro de um período de tempo de dois minutos, guie-o suavemente usando um bastão de madeira. Permita que o rato se acostume com o ambiente do labirinto enquanto estiver na plataforma por uma duração de 20 segundos e, em seguida, remova-o.
No sexto dia, que é o dia do teste da sonda, remova a plataforma do labirinto aquático e posicione o rato no mesmo quadrante por uma duração de dois minutos. Empregar o sistema de monitoramento para observar e registrar continuamente o comportamento do rato. A coordenação motora foi avaliada pré e pós-anestésica ou lesão por meio da tarefa de feixe.
No primeiro dia pós-lesão, os ratos com mTBI mostraram significativamente mais deslizamentos de membros posteriores em comparação com shams. No entanto, após dois dias, os escorregões dos membros posteriores voltaram aos níveis simulados. Todos os seis ratos com TCEm apresentaram mais deslizamentos de membros posteriores pós-impacto, sem diferenças nos tempos de travessia do feixe entre TCEm e ratos simulados.
A distância percorrida não mostrou diferenças significativas entre os grupos sham e mTBI. Comportamento semelhante à ansiedade foi evidente em ratos com mTBI três e sete dias após a lesão, permanecendo menos tempo na zona central durante o teste de campo aberto. Os resultados do labirinto aquático de Morris indicaram prejuízo no aprendizado espacial e na memória em ratos com TCEm.
Eles levaram mais tempo para encontrar a plataforma oculta e gastaram menos tempo procurando a plataforma removida durante o teste de sonda, sem diferenças na velocidade de natação sugerindo nenhum impacto na função locomotora espontânea.
