Fluorescent Labeling of Antibodies for Imaging Low Abundance Proteins in Drosophila

Para começar, adicione 110 microlitros da mistura de anticorpos ao tubo contendo o corante Alexa fluor 594. Inverta o tubo várias vezes para misturar bem os componentes. Incubar o tubo num rotador durante uma hora à temperatura ambiente.

Em seguida, monte a coluna de purificação do kit de conjugação e prepare uma cama de resina de 1,5 mililitro. Centrifugar a coluna a 1100G durante três minutos à temperatura ambiente para remover o excesso de líquido da resina. Adicione a mistura de reação gota a gota na parte superior da coluna de resina.

Centrifugar a 1100G por cinco minutos a quatro graus Celsius para coletar o anticorpo marcado.