Comece configurando o sistema de bomba para as pinças hipoglicêmicas ou hiperglicêmicas. Para isso, preencha duas seringas de Hamilton com o infusato de insulina e solução de glicose a 30%. Conecte as seringas cheias às duas tubulações longas da configuração do tubo de extensão destinado à infusão de glicose e insulina.
Depois de fixar o conjunto da seringa às respectivas bombas de seringa, encha cada solução nos respectivos tubos de extensão. Em seguida, encha o soro fisiológico na seringa de um mililitro e no tubo de extensão para a coleta de sangue da artéria. Em seguida, conecte o tubo de extensão para infusão ao cateter de veia jugular pré-instalado do mouse devidamente anestesiado.
O tubo de extensão para coleta de sangue para o cateter da artéria carótida do animal. Use fita celofane para prender os tubos. Coloque o rato com as tubulações dentro de um copo vazio de 500 mililitros com roupa de cama.
Aperte a extremidade superior do tubo de extensão para a colheita de sangue enquanto o liga a uma nova seringa. Extraia 50 microlitros de sangue, transfira-o para um tubo de 1,5 mililitro e meça o nível de glicose no sangue. Em seguida, infundir 50 microlitros de soro fisiológico.
Para coletar sangue para medições hormonais, extraia mais 50 microlitros de sangue e transfira-o para um tubo de 1,5 mililitro no gelo. Após a medição da glicemia zero minuto, inicie a bomba da seringa de insulina para infundir a quantidade adequada de insulina. Continue medindo o nível de glicose no sangue e altere a taxa de infusão de glicose a cada 5 a 10 minutos durante o tempo de monitoramento de 120 minutos até que um estado estacionário seja atingido.
Para a pinça hiperglicêmica, siga os passos demonstrados para a pinça hipoglicemiante, excluindo infusão de insulina, e um nível de glicose no sangue em estado estacionário ajustado.
